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汞(Hg)是一种重金属污染物,具有高毒性、易富集和难降解等特点,对人类健康和生态系统功能构成潜在威胁。由于自然释放和人类活动,越来越多的汞及其化合物进入水环境中,对鱼类的生存和健康造成危害。尽管已有研究证实汞对鱼类的繁殖有不利影响,但关于生命早期汞暴露对成年期生殖健康的影响以及这些影响是否可以转移给后代知之甚少。基于此,本研究以斑马鱼为研究对象,研究了仅生命早期环境相关浓度Hg2+暴露后对其成年期繁殖力、性腺发育、血浆性激素含量以及下丘脑-垂体-性腺轴(HPG轴)关键基因表达水平的影响,阐明生命早期Hg2+暴露对鱼类后期生殖的影响及其潜在机制;在此基础上,为探究该影响的持久性,继续在子一代和子二代中检测上述指标,明确早期Hg2+暴露对鱼类的生殖损伤是否具有代际效应以及后代能否恢复,为评估汞暴露对鱼类生殖系统的持久性潜在危害奠定理论基础。1.生命早期Hg2+暴露对斑马鱼成鱼生殖的影响在这项研究中,将斑马鱼胚胎分别暴露于不同浓度的Hg2+(0.6、3和15μg/L)5天(d),然后在清水中饲养115 d至成年(此为F0代),分析其繁殖能力、性腺组织学、血浆中性激素含量,以及HPG轴中关键基因的表达水平。结果显示,与对照组相比,生命早期Hg2+暴露导致成年期斑马鱼性腺(卵巢和精巢)中总汞含量显著升高、性腺指数和21 d累积产卵量显著降低、雌鱼雌二醇(E2)含量下降而雄鱼升高、精巢和卵巢中处于成熟期的生殖细胞比例下降而处于早期的比例上升。在雌鱼中,生命早期Hg2+暴露下调了HPG轴中gnrh3、lhβ、lhr、cyp19a1b、cyp19a1a和erα基因的表达水平;在雄鱼中,gnrh3、fshβ、fshr、lhβ和lhr基因的表达水平下调而cyp19a1b和erα基因的表达水平上调,但cyp11b2和ar的表达水平没有显著变化。此外,生命早期Hg2+暴露还下调了雄鱼精子发生关键基因(pcna、cyclinb1、cyclind1、sycp3和dmc1)的表达水平。因此,本研究表明,生命早期Hg2+暴露导致斑马鱼成鱼性腺汞积累,并通过改变HPG轴中关键基因的表达水平扰乱性激素平衡和配子发生,从而抑制性腺发育并引起性腺指数降低,最终导致繁殖力下降。2.亲代生命早期Hg2+暴露对斑马鱼子代生殖的影响为了进一步研究生命早期Hg2+暴露对斑马鱼生殖的影响是否会持续至后代,从上述F0代各组成年斑马鱼中收集胚胎于清水中饲养120 d至成年(此为F1代),并以同样的方法从F1代各组中收集胚胎在清水中饲养120 d至成年(此为F2代),并分别对F1代和F2代的成鱼进行取样分析。结果显示,在F1代雌鱼中检测到了类似但轻于F0代雌鱼的损伤,包括血浆中E2含量降低、卵巢中成熟期生殖细胞比例减少而早期生殖细胞比例增多、HPG轴中cyp19a1b和cyp19a1a基因表达水平下调,表明亲代早期Hg2+暴露诱导的生殖损伤在F1代雌鱼中仍存在但有所恢复。然而,在F1代雄鱼中所检测的所有指标均无显著变化,表明亲代早期Hg2+暴露诱导的生殖损伤在F1代雄鱼中已恢复。对于F2代,无论是雌鱼还是雄鱼,所有检测的指标均较对照组无显著变化,表明Hg2+诱导的生殖损伤在F2代中已完全恢复。因此,本研究表明,生命早期Hg2+暴露可损伤斑马鱼成年期的繁殖功能,并对F1代雌鱼产生代际影响,但这种损伤可以在F1代雄鱼和F2代雌鱼中得以恢复。