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盐碱是农业生产面临的重要的非生物逆境,是影响农作物生长、发育和产量最严重的非生物胁迫之一。培育耐盐碱(耐旱)农作物是充分利用盐碱地最为经济、快捷的方式。本研究将Bar基因和来源于榆钱菠菜(Atriplex hortensis)的AhBADH基因转入水稻光温敏核不育系P88S,得到如下主要研究结论:
1.以P88S成熟胚诱导的愈伤组织作为基因枪转化的受体材料,将Ubi启动子驱动的AhBADH基因和CaM V35S启动子驱动的Bar基因导入籼型光温敏核不育系P88S,获得14株再生植株。再生苗经0.75 g/L除草剂草铵膦涂布筛选,14株均表现出对草铵膦抗性。
2.除草剂抗性植株的PCR检测和Southern检测的结果表明目的基因AhBADH和Bar基因已经整合到水稻基因组中。
3.转基因T2代草铵膦发芽试验表明Bar基因在T2代正常表达。存活株数/死亡株数的发芽分离比为3:1或15:1;卡平方测验显示均符合孟德尔定律。
4.在NaCl胁迫处理下,T2代转基因水稻在芽期和苗期的耐盐性都比非转基因对照株系高,表明转AhBADH基因可以提高P88S的耐盐性。
5.T1转基因植株的花粉育性鉴定表明,不育系材料P88S经过遗传转化后大部分植株的花粉育性发生改变,表现出一定的可育性。
6.转基因植物中BADH酶活检测实验表明,转基因植株中1、9、12号酶活性较高。