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目的:大量淋巴细胞浸润甲状腺组织是桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)疾病的主要病理特点。本文旨在探讨β-catenin是否参与调节桥本氏甲状腺炎组织中趋化因子的产生进而影响淋巴细胞向甲状腺组织浸润这一过程,探索其分子作用机制,为HT致病机制的研究提供新的方向。方法:1.采用HE染色法检测桥本氏甲状腺炎以及单纯结节性甲状腺肿患者甲状腺组织中淋巴细胞的浸润情况。2.采用免疫组织化学法检测桥本氏甲状腺炎以及单纯结节性甲状腺肿患者甲状腺组织中β-catenin、IFN-γ的表达情况。3.甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1用不同浓度IFN-γ(250、500、1000 U/mL)处理后,采用Western blot检测细胞全蛋白中β-catenin的表达、细胞核/浆蛋白中β-catenin的表达,并采用实时定量PCR方法检测β-catenin的mRNA水平。4.甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1经IFN-γ(500 U/mL)单独处理不同时间(1.5、3、6、12、24 h)后,Western blot检测Wnt信号通路蛋白p-GSK-3β、GSK-3β及β-catenin的表达变化。5.甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1经IFN-γ(500 U/m L)单独处理或IFN-γ(500 U/mL)联合LiCl(10 mM)处理后,收集细胞培养上清,蛋白芯片法检测其中38种趋化因子的分泌情况,实时定量PCR方法检测趋化因子mRNA的表达水平。6.用siRNA-GSK-3β转染甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1后,检测IFN-γ处理对趋化因子调节作用的变化。7.用siRNA-β-catenin转染甲状腺上皮细胞株Nthy-ori 3-1后,检测IFN-γ处理对趋化因子调节作用的变化。结果:1.桥本氏甲状腺炎组织中淋巴细胞浸润明显高于正常对照组,ifn-γ表达水平明显高于正常对照组,而β-catenin表达水平明显低于正常对照组。2.与对照组相比,梯度浓度ifn-γ处理致甲状腺上皮细胞β-catenin蛋白表达水平明显下降,β-catenin入核减少,以500u/mlifn-γ处理组降低最明显(p<0.05);而β-catenin的mrna水平并无明显改变。3.与对照组相比,甲状腺上皮细胞经ifn-γ(500u/ml)单独处理不同时间(1.5、3、6、12、24h)后,p-gsk-3β的蛋白表达水平明显增高,而β-catenin的蛋白表达从6h组开始明显降低(p<0.01)。4.与对照组相比,ifn-γ处理可致甲状腺上皮细胞趋化因子ccl2、ccl5、cxcl10、cxcl16、gro蛋白分泌增加(p<0.05);而较ifn-γ处理组,ifn-γ联合licl处理组ccl5、cxcl16、gro分泌降低(p<0.05),而ccl2、cxcl10无明显变化。5.用sirna-gsk-3β联合ifn-γ处理甲状腺上皮细胞株nthy-ori3-1,与单独ifn-γ处理组相比,趋化因子ccl5、cxcl16、gro-2、gro-3的分泌水平下降(p<0.05)。6.用sirna-β-catenin联合ifn-γ处理甲状腺上皮细胞株nthy-ori3-1,与单独ifn-γ处理组相比,趋化因子gro-2、gro-3、ccl5、cxcl16的分泌水平增加(p<0.05)。结论:桥本氏甲状腺炎患者的甲状腺组织中淋巴细胞大量浸润、ifn-γ表达明显增加,而甲状腺滤泡细胞中β-catenin表达明显减少;体外实验显示,ifn-γ通过活化wnt信号蛋白gsk-3β使得β-catenin的降解增加,并促进趋化因子的分泌。采用licl或sirna抑制gsk-3β的蛋白活性能够逆转ifn-γ对趋化因子分泌的诱导作用,而采用sirna抑制β-catenin的表达能够增强ifn-γ对趋化因子分泌的诱导作用。上述结果提示IFN-γ可通过甲状腺上皮细胞GSK-3β/β-catenin途径对趋化因子的分泌进行调控,可能是诱导桥本氏甲状腺炎淋巴细胞浸润的重要机制之一。