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目的：1.观察β-榄香烯对小鼠肝癌细胞BNL增殖及凋亡的影响；2.观察β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗诱导体内外免疫应答及抑制肝癌荷瘤小鼠皮下移植瘤生长的情况,探讨β-榄香烯抗肿瘤作用的免疫机制。方法：1.体外培养小鼠肝癌细胞BNL,用不同浓度β-榄香烯进行干预,CCK-8法检测p-榄香烯对肝癌细胞BNL增殖的影响,Annexin V FITC/PI双染法分别通过荧光显微镜和流式细胞术检测β-榄香烯处理后肝癌细胞BNL凋亡情况；2.建立肝癌细胞BNL荷瘤小鼠模型,尾静脉快速联合注射Flt3-L和GM-CSF质粒法诱导小鼠脾脏来源DC,流式细胞术检测其表型,高速分步离心法获得肝癌细胞BNL来源自噬小体(DRibble),制备DC/DRibble疫苗；3.无菌获取健康小鼠脾细胞,分设空白对照组、DRibble组、DC组、DC/DRibble疫苗组,各组分设不同浓度β-榄香烯0、4、10、40(μg/ml)刺激,共孵育72h, CCK-8法检测脾细胞增殖情况,ELISA法检测培养上清中IFN-γ、IL-4分泌水平；4.预先以不同方式免疫健康小鼠,分设对照组、β-榄香烯组、DC/DRibble疫苗组、β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗组,对照组皮下、腹腔注射PBS,β-榄香烯组和联合组连续7天腹腔注射β-榄香烯50mg/(kg·d), DC/DRibble疫苗组和联合组分别在第1天淋巴结注射疫苗,第3、第5天皮下注射疫苗,第10天处死小鼠,无菌获得小鼠脾脏,制备细胞悬液,分设不加刺激和Dribble刺激组,孵育72h, ELISA法检测上清中IFN-γ的含量；另外给予联合组小鼠脾细胞不同刺激,分设对照组、DRibble组、DC组、疫苗组,孵育72h, ELISA法检测上清中IFN-γ的含量；建立小鼠肝癌荷瘤模型,分为对照组、β-榄香烯组、疫苗组、联合组,治疗方式同上免疫方式,观察各组小鼠的肿瘤大小变化及生存期,第23天处死小鼠,剥取肿瘤组织经HE染色,光学显微镜观察肿瘤组织病理形态学表现。结果：1.β-榄香烯对小鼠肝癌细胞BNL的生长具有显著抑制作用,呈浓度和时间依赖性,药物作用早期可诱导细胞凋亡,凋亡率随药物浓度增加而递增,随着作用时间延长肝癌细胞坏死明显增多；2.建立稳定肝癌荷瘤小鼠模型,选定2×106个细胞/只作为接种建模剂量,联合注射GM-CSF和Flt3-L质粒后发现小鼠脾脏明显增大,流式细胞术检测其中CDllc+细胞比例高达20%左右,测定提取DRibble总蛋白含量为2μg/μl;3.体外检测发现DC/Dribble疫苗组、单独Dribble组均能促进脾细胞增殖,并且DC/Dribble疫苗组明显优于其他组(P<0.001); DC/Dribble疫苗组在β-榄香烯的浓度为10μg/ml时其促进脾细胞增殖的能力明显优于其他浓度组(P<0.001),但高浓度组促进脾细胞增殖的能力明显降低,Dribble组出现同样趋势；DC组及对照组在加入不同浓度β-榄香烯后均无促进脾细胞增殖的能力(P>0.05)；各组细胞上清中IFN-γ分泌趋势同上,但IL-4分泌量极低,无统计学意义;4.体外检测发现不同方式免疫后小鼠中,联合组IFN-γ分泌量明显高于其他组(P<0.01),β-榄香烯组、疫苗组高于对照组(P<0.01)；给予免疫后小鼠脾细胞不同刺激,发现疫苗组、Dribble组均能刺激脾细胞分泌大量IFN-γ (P<0.01),当β-榄香烯刺激浓度10μg/ml时,分泌明显增多(P<0.01)；体内观察发现联合治疗组小鼠移植瘤生长速度明显减慢,瘤表面积、生存期与其他组相比均有统计学差异(P<0.01),肿瘤组织HE染色发现对照组可见肿瘤细胞大小、形态不一,核大,深染,核分裂相易见,周围可见疏松结缔组织,未见明显炎细胞浸润,并可见丰富血管,而联合组可见周围结缔组织包裹紧密完整,大量炎性细胞浸润,其中包括中性粒细胞,单核巨噬细胞和淋巴细胞。结论：β-榄香烯抑制肝癌细胞增殖、促进其凋亡是其抗肿瘤重要机制之一；β-榄香烯联合DC/DRibble疫苗能够诱导机体特异性免疫应答并且以细胞免疫应答为主,其发挥抗肿瘤作用的免疫效应基础可能与增强DC抗原递呈功能有关。