人消化道源儿茶酚类铁载体高产菌株的筛选及其产酶活性与益生菌的特征研究

来源 :集美大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lf740047016
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
儿茶酚类铁载体是由非核糖体肽合成酶(NRPS)参与合成的一类低分子量高效铁螯合剂,在胃肠道中分布广泛,对微生物细胞的铁营养平衡具有重要作用;胃肠道微生物菌群分泌的胞外酶具有许多人体自身不具备的代谢功能,参与机体营养代谢的过程中对胃肠道的营养与健康发挥益生功效,因此,筛选符合益生菌特征且具有产酶活性的人消化道源儿茶酚类铁载体高产菌株,在食品、医药和工农业生产等领域具有重要的潜在应用价值。本研究以21株人胃肠道源微生物为研究对象,筛选NRPS功能基因片段腺嘌呤结构域(A domain),结合16S rRNA基因序列和NRPS A domain氨基酸序列分析,得到8株产儿茶酚类铁载体菌株,分别命名为Escherichia coli Gut 01、Bacillus sp.Gut 03、Escherichia coli Gut 07、Escherichia coli Gut 12、Escherichia coli Gut 13、Bacillus sp.Gut 14、Bacillu cereus Gut 16和Escherichia coli Gut 20,经NRPS合成的次级代谢产物分属于肠杆菌素(Enterobactin)和芽孢杆菌素(Bacillibactin)。利用Rioux法测定儿茶酚类铁载体产量,其产铁载体能力具有显著差异,菌株B.cereus Gut 16产芽胞杆菌素的能力最强(94.75±0.40μM),菌株E.coli Gut 07产肠杆菌素的能力最强(66.48±0.10μM)。以儿茶酚类铁载体产量较高的四株菌为研究对象,分析其产酶活性,四株高产菌株都有淀粉酶、纤维素酶和β-葡萄糖苷酶活性,除B.cereus Gut 16以外都有乳糖酶和植酸酶活性,B.cereus Gut 16和E.coli Gut 20具有脂肪酶活性,仅B.cereus Gut 16具有蛋白酶活性。利用体外模拟胃肠道环境连续培养法测定四株菌株的存活率,结果表明其具有较强的耐酸耐胆盐能力,在模拟胃部培养6 h的存活率大于60%,在模拟肠道培养24 h的存活率为102.84%114.70%。通过测定四株高产菌株的自凝集率、黏蛋白粘附率和表面疏水率,结果表明其具有较强的肠道粘附定植能力:在20 h的自凝集率介于30%40%之间;黏蛋白粘附率介于26.20%56.67%之间;对二甲苯、三氯甲烷和乙酸乙酯三种有机溶剂的表面疏水率分别为5.72%57.68%、31.65%46.78%、21.79%55.18%。四株高产菌株的抗生素耐受性研究发现,E.coli Gut 07、E.coli Gut 12和E.coli Gut 20对青霉素、苯甲异恶唑青霉素、四环素、多西环素和红霉素具有耐受性,对其它15种测试抗生素均没有耐受性;B.cereus Gut 16对羧苄青霉素、丁胺卡那霉素、四环素和红霉素具有耐受性,对其它16种抗生素没有耐受性。小鼠经口急性毒性实验结果显示,四株菌株的半数致死量(LD50)和小鼠最大耐受剂量(MTD)均大于9.0×1012 CFU/kg体重(bw),各组小鼠均未出现腹泻、中毒和死亡病例,四株菌株在浓度不大于4.5×1011 CFU/mL,灌胃剂量为20 mL/(kg bw)时对小鼠无急性毒性,无菌株移位现象,可以作为潜在益生菌对其进行应用研究。胃肠道微生物菌群具有庞大的微生物资源和基因资源,是挖掘新型天然产物和潜在益生菌的重要来源。本研究得到四株符合益生菌特征且具有多重产酶活性的人消化道源儿茶酚类铁载体高产菌株,为儿茶酚类铁载体产生菌的应用及其在胃肠道营养与健康中发挥功能作用的研究奠定基础。
其他文献
微博、微信、官方网站等新兴传播媒介的出现与快速普及,引导现今社会走入了一个新的传播环境,新的媒体出现以后催生了新的传播媒介,并且,在这种以信息技术为基础的新媒介下使
柏拉图的“哲学王”理论是其政治哲学的一个重要理论,它直接贯穿于其中期最重要的著作《理想国》当中。而对于“哲学王”这一制度,历史上也存在着很多种不同的声音,对它有着
标题是新闻的眼睛,对于网络新闻来说,标题还是吸引网络受众注意力的关键、是受众决定是否索取深层新闻的第一选择关口。网络新闻标题在网络新闻生产语境中有着十分重要的意义
引导舆论是新闻媒体最基本的社会功能。新闻媒体实施舆论引导战略的常规武器就是正面报道,正面报道的好坏,直接影响新闻宣传的效果,影响新闻引导舆论的能力。地市电视台作为
人工神经网络是一种新型的技术,主要是运用于建模中,其在人工智能领域应用比较广泛,而且能够解决复杂的线性问题,本文通过对人工神经网络进行分析,分析人工神经网络的构成,阐
第六十九类N-卤代化合物活性特点:含有N-X键的许多化合物显示出不稳定性和爆炸性,同时又是氧化剂。二氟基化合物,包括从二氟化氨、四氟联氨至聚二氟氨基化合物等一系列物质,
公共外交是近年来一种新型的外交形式,世界上许多国家都采取公共外交的形式来提升在国际社会中的形象。俄罗斯在公共外交领域应当说基本上是刚刚开始。作为一个"新手"或"后来
随着以互联网为首的新媒体强势崛起,信息爆炸时代随之到来。人类从信息匮乏的状态迅速踏入信息泛滥的状态。面对过量的信息,受者显得无所适从。34年前俄国作家索尔仁尼琴在哈
<红楼梦>与<源氏物语>是中日两部古典名籍.本文以两书男主人公贾宝玉与源氏出家这一文化代码为中心展开比较分析.首先讨论了二人出家的现实原因,继而探究了不同文化语境下二
微博在当今自媒体时代早已成为个人话语表达的重要平台,很多在传统媒体工作的记者都创建了自己的微博,此时他们身上具有两重身份:既是媒体机构的记者,需要在传统媒体上记录事