SAHA联合高三尖杉酯碱对K562细胞株体外凋亡及细胞周期的影响

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目的:探讨辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)单用及联合高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)时对人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡和细胞周期的影响。方法:采用CCK-8试剂盒观察SAHA和HHT单用及两者合用对体外培养的K562细胞凋亡的影响。采用HE染色、荧光染色法观察用药后细胞形态,用流式细胞仪(fluorescence activated cell sorter,FACS)检测细胞凋亡率及细胞周期。结果:1、CCK-8试剂盒测定显示SAHA能抑制K562细胞的增殖,呈剂量依赖性和时间依赖性。2、随着药物浓度的增加SAHA用药组的抑制率显著高于HHT用药组。3、用金氏公式判定2umol/L和4umol/L SAHA与0.05ug/mL HHT有协同抑制增殖作用。4、流式细胞仪分析显示,SAHA处理组出现一特征性的亚二倍体凋亡峰,其凋亡率呈时间、剂量依赖性。联合用药时,凋亡率高于单独用药组。5、FACS检测显示,单用SAHA可使K562细胞阻滞G0/G1期,其阻滞细胞的数量与药物浓度呈正相关,以作用48小时对细胞周期的阻滞作用最强;联合用药时,细胞周期阻滞作用比单独用药时更加明显。结论:①SAHA比HHT更有效的抑制K562细胞的增殖;②SAHA对K562细胞的杀伤作用主要是通过诱导细胞凋亡实现,使细胞周期停滞于G0/G1期是细胞凋亡发生的机制之一;③SAHA与HHT联合用药时对K562细胞具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的协同作用。
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