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本研究通过对峙培养和盆栽试验筛选了烟草黑胫病的拮抗细菌,同时对云南省烟草科学研究所提供的烟草黑胫病拮抗细菌菌株进行鉴定,并研究这些拮抗菌株的抗菌物质特性、液体培养的最优化条件。 从采集的18份土样中共分离出442个菌株,通过平板对峙培养法从中筛选到对烟草疫霉（Phytophthora parasitica var. nicotianae）表现拮抗作用的44个细菌分离物。从中选出11个分离物与云南省烟草科学研究所提供的11个细菌菌株进行了盆栽试验,证明B254、HJ01912、HK281、TS-4、ME2、HJ01916、1KMB-2和HK282等8个细菌分离物抑制黑胫病的效果达到极显著水平,与药剂处理和健株对照无显著差异。测定了27个拮抗菌株培养滤液对烟草疫霉的抑菌活性。HJ01916培养滤液的抗菌活性最强。说明该菌株的代谢产物中含有对烟草黑胫病菌拮抗作用的物质,其抗菌机制主要是抗生作用。 选择HJ01916菌株进行拮抗物质特性的研究。HJ01916菌株培养滤液的抑菌活性有部分热稳定性,但对80℃以上的高温敏感,对蛋白酶K部分敏感,培养滤液的（NH4）2SO4盐析沉淀物具有抑菌活性,说明该菌株的培养滤液中存在有拮抗蛋白。烟草疫霉菌丝体在HJ01916菌株的培养滤液培养48h后表现畸形。HJ01916的培养性状与生理生化特征与Bacillus subtilis相似。PCR扩增获得HJ01916的16S rDNA序列全长1424bp（GenBank序列登录号AY894690）。以细菌16S rDNA同源性为基础的系统发育分析表明,HJ01916和B. subtilis（AY583216）处于同一分支,说明HJ01916与B.subtilis的亲缘关系最近。确定HJ01916属于枯草芽孢杆菌B.subtilis的一个菌株。 采用正交L27(313)试验设计对云南省烟草科学研究所提供的HJ01912菌株发酵培养基进行优化。,在实验室条件下HJ01912菌株优化培养基配方为:葡萄糖1%,蛋白胨1.5%,硫酸铵0.08%,硝酸钠0.2%,碳酸钙O.15%,磷酸氢二钾0.3%,硫酸镁0.035%。HJ01912菌株实验室发酵培养的最适条件是:250ml三角瓶培养液100ml,pH5～6,40℃,72h。