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土拨鼠和土拨鼠肝炎病毒是HBV研究和疫苗、药物评价的良好模型，但关于土拨鼠基本的免疫分子的检测试剂尚不完善。本论文主要开展了利用原核和真核表达系统表达了wIFN-α-1e和wIFN-α-5c，并免疫家兔制备相应的抗体。另外，根据国家的战略需求建立了检测土拉弗氏菌的ELISA和Real-time TaqMan PCR快速检测方法，以应对可能的恐怖袭击。
论文构建了含有wIFN-α-1e和wIFN-α-5c原核表达质粒，通过诱导获得分子量约为42 kD带有6个His标签的两种融合蛋白。表达纯化的蛋白免疫家兔获得了高效价的多克隆抗体。此外，利用AcMNPV Bac-to-Bac表达系统，构建了分别含wIFN-α-1e和wIFN-α-5c的两个重组杆状病毒vAc-His-wIFNα-1e和vAc-His-wIFNα-5c，其中vAc-His-wIFNα-1e在昆虫细胞Tn-Hi5中高效表达了wIFN-α-1e。
土拉费氏菌(Francisella tularensis)因易发酵、少量即可引起大规模感染引起致死疾病等特性可能用于生物恐怖，建立快速、准确、高灵敏的检测方法尤为重要。本论文首先以土拉费氏菌特有的外膜蛋白FopA作为检测对象建立了ELISA检测方法。原核表达纯化获得大量表达融合His标签的重组蛋白FopA，并免疫家兔和小鼠，得到高效价的兔源和鼠源的多克隆抗体。通过条件优化确定基于重组蛋白FopA的间接ELISA最佳抗原包被浓度为6μg/ml，最佳血清稀释浓度为1：1000。至少可检测稀释度为1：100000的阳性血清。利用FopA兔源的多克隆抗体建立了双抗体夹心ELISA法，以5μg/ml纯化后的多克隆抗体包板，酶标记抗体最佳稀释度为1：200。最低可检测重组蛋白FopA浓度为100 ng/ml。同时，还建立了土拉菌的核酸检测方法。针对土拉菌的外膜蛋白FopA基因和17KD外膜脂蛋白TUL4基因，采用Primer express软件设计并合成了Taqman探针，进行Real-Time PCR。检测的线性范围为108-102 c/r，最低能检出l02copies/μl。