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本研究以活蚕蛹为试验材料,利用大肠杆菌刺激作用,通过诱导法诱导蚕蛹产生对病菌有抑制作用的抗菌肽。采用乙酸浸提法提取蚕蛹抗菌肽,并将该抗菌肽加热除杂、Sephadex G-50以及Sephadex G-25葡聚糖凝胶层析方法对所提取的蚕蛹抗菌肽进行纯化。通过Tricine SDS-PAGE电泳确定蚕蛹抗菌肽的相对分子质量,对纯化后的蚕蛹抗菌肽部分理化性质进行研究,并对提取的蚕蛹抗菌肽对低温香肠的防腐作用进行了研究。研究结果如下:(1)注射30μL10-3大肠杆菌液诱导蚕蛹产生抗菌肽的抑菌效果比其他方法好。(2)通过响应面分析确定乙酸浸提蚕蛹抗菌肽的最佳提取条件为:乙酸浓度5%、料液比1:2,浸提时间8h。此条件下提取蚕蛹抗菌肽抑菌效果最佳,预计抑菌圈直径为1.90cm。(3)通过加热去除大部分热变性杂质,再经过Sephadex G-50和Sephadex G-25葡聚糖凝胶层析纯化,真空干燥得到纯净抗菌肽粉末,验证蚕蛹抗菌肽的抑菌活性:对大肠杆菌的抑菌圈直径为2.00cm。(4)通过Tricine SDS-PAGE电泳,确定蚕蛹抗菌肽相对分子质量为4.85kDa。(5)经分离纯化后的蚕蛹抗菌肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肠炎沙门氏菌、啤酒酵母菌均具有抑菌活性,抑菌圈直径分别为:2.01cm、1.96cm、0.90cm、1.78cm,但对黑曲霉菌没有抑菌效果。(6)提取的蚕蛹抗菌肽具有较强耐热性,在100℃处理20min对大肠杆菌的抑菌效果基本保持不变;是一种偏碱性小分子蛋白,pH在7.0~7.5时抑菌圈平均直径为1.975cm;是一种性质稳定抗菌肽,在室温下放置一定时间保持稳定活性;当盐离子浓度过大时对抗菌肽抑菌效果有一定影响,调节样液盐离子浓度为0.2mol/L时,其抑菌活性最佳,对大肠杆菌的抑菌圈直径为2.02cm。(7)以山梨酸钾和乳酸链球菌素为对照,以未加任何防腐剂的香肠样品为空白样,研究蚕蛹抗菌肽对低温香肠的防腐作用。结果表明,蚕蛹抗菌肽对低温香肠的防腐效果良好,适宜添加量为0.6g/kg。在与另外两种防腐剂比较:添加同一浓度,防腐效果强于乳酸链球菌素,但略低于山梨酸钾的防腐效果;添加复合防腐剂总量一定情况下,蚕蛹抗菌肽与乳酸链球菌素复合效果最好,在4。C条件下可以保藏49d。