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研究背景:前列腺癌(prostatecancer)是男性非常常见的恶性肿瘤,尤其是在欧美国家的发病率一直居首位。近年来我国的发病率呈快速上升趋势,特别是经济发达地区。大部分转移患者经过14-30个月的雄激素剥夺治疗(androgen deprive therapy,ADT)后,终将不可避免地发展为去势抵抗性前列腺癌(castration resistant prostate cancer,CRPC),CRPC平均生存期不超过2年。目前去势抵抗型前列腺癌是目前临床治疗的难点和基础研究的热点,尚缺乏有效方法,恩杂鲁胺(MDV3100)作为新一代选择性雄激素受体(AR)拮抗剂,与比卡鲁胺比较,对雄激素受体具有更高的亲和力,但是有约20%～40%的前列腺癌患者对恩杂鲁胺先天性耐药,而初始对恩杂鲁胺敏感的患者在使用一段时间后也会产生耐药。目前恩杂鲁胺耐药的机制尚不明,如果能阐明其耐药机制,对临床用药、延长病人生存期等都有着非常重要的意义。研究目的:本研究研究目标是探索TR4在去势抵抗性前列腺癌耐恩杂鲁胺中的作用,并通过深入研究其机制找到TR4引起耐药的一些潜在机制,为临床合理用药以及探索新的治疗方法提供潜在的靶向位点。研究方法:前列腺癌细胞株C4-2和22Rv1作为实验材料,并使用逐步提高恩杂鲁胺的浓度来培养C4-2恩杂鲁胺耐药株,MTS实验检测耐药株的耐药性。用蛋白免疫印迹(Western blot)、实时荧光定量 PCR(Real Time quantita-tivePCR)检测前列腺癌细胞水平TR4、Malatl、AR-v7的表达情况及相关性;用慢病毒来建立不同TR4表达水平的稳转前列腺癌细胞系后检测Malatl、AR-v7的表达情况,MTS实验检测TR4对恩杂鲁胺敏感性及耐药性的影响;使用Malatl siRNA转染过表达TR4的C4-2和22Rv1细胞,用Western blot确认TR4通过Malatl对AR-v7的调控来影响前列腺癌细胞对恩杂鲁胺的敏感性;用双荧光素酶报告基因检测系统和染色质免疫复合物共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation)明确TR4对Malatl的表达调控。研究结果:在恩杂鲁胺处理的前列腺癌细胞系和耐恩杂鲁胺的前列腺癌C4-2细胞系中,TR4和AR-v7表达增加。在前列腺癌细胞中TR4的表达升高引起AR-v7表达升高,并导致对恩扎鲁胺的敏感性下降。反之,敲低TR4引起AR-v7表达降低,增加了前列腺癌细胞对恩杂鲁胺敏感性。进一步深入机制分析显示TR4可能通过改变lncRNA Malat1在转录水平表达来增强AR-v7表达,且通过malatl siRNA敲低Malatl表达可以逆转增强TR4表达的前列腺癌细胞对恩杂鲁胺的耐药性。结论:本文的结论有两点:①TR4降低了影响前列腺癌细胞对恩杂鲁胺的敏感性;②TR4/Malat1/AR-v7信号通路可能介导了前列腺癌细胞对恩杂鲁胺的耐药,为新的治疗方法提供了潜在的靶向位点。