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第一部分血清外泌体ERG,SPDEF,PSMA在前列腺癌患者中的表达情况目的:近年来研究表明ERG,SPDEF,PSMA在前列腺癌血清中表达均升高。外泌体是一种脂质双层膜囊泡,此结构能很好的保护膜内RNA。本实验用实时荧光定量PCR方法,检测血清外泌体ERG,SPDEF,PSMA在前列腺癌患者中的表达情况,联合数个指标探索诊断前列腺癌的临床价值,探讨其成为新生物指标物的可能性。方法:1.收集血样标本:前列腺癌患者63例,前列腺增生患者37例,健康对照组61例;2.采用试剂盒提取血清外泌体,首先逆转录和预扩增,实时荧光定量PCR检测样本中ERG,SPDEF,PSMA的表达;3.使用SPSS22.0软件进行统计学分析血清外泌体ERG,SPDEF,PSMA的表达量,组间比较用独立性t检验,ROC曲线和Fisher线性判别函数评估其在前列腺癌患者中的诊断价值。结果:1.前列腺癌患者血清外泌体ERG、SPDEF、PSMA表达水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);前列腺癌组血清外泌体ERG、SPDEF、PSMA表达水平均高于与前列腺增生组(P<0.05);前列腺增生组与健康对照组差异没有统计学意义(P>0.05)。2.根据63例前列腺癌患者血清外泌体ERG、SPDEF、PSMA表达水平行ROC曲线绘制,血清ERG、SPDEF、PSMA和三者联合曲线下面积(AUC)分别为0.891、0.875、0.887、0.933,灵敏度分别为93.7%、90.5%、94.4%、95.2%,特异度分别为72.1%、70.5%、72.1%、77.0%。联合检测三者的AUC、灵敏度和特异度均较高。3.对161例样本应用Fisher线性判别函数,采用血清外泌体ERG、SPDEF、PSMA,基因分类正确为86.3%。结论:1.前列腺癌血清外泌体ERG、SPDEF、PSMA表达水平均高于健康对照组和前列腺增生组,差异有统计学意义。健康对照组和前列腺增生组无统计学意义;2.联合三者检测血清外泌体ERG、SPDEF、PSMA诊断前列腺癌的AUC、灵敏度和特异度均比单独检测的高,AUC为0.933。3.联合血清外泌体基因分类正确率为86.3%;第二部分血清外泌体ERG、SPDEF、PSMA与前列腺癌患者临床病理间的关系目的:第一部分已证实前列腺癌患者中血清外泌体ERG、SPDEF、PSMA表达水平高于健康对照组,收集前列腺癌患者临床病理数据,本部分更进一步研究血清外泌体ERG、SPDEF、PSMA的表达与临床病理特征的关系,探讨其判断预后的价值。方法:用实时荧光定量PCR检测前列腺癌63例血清外泌体ERG、SPDEF、PSMA的表达情况,收集前列腺癌患者的临床病理数据,包括年龄、PSA水平、Gleason评分、TNM分期、危险因素分级等,分析ERG、SPDEF、PSMA的表达量与临床病理的相关性。用SPSS22.0软件进行统计学分析,以均数±标准误表示数据资料,通过独立t检验两组间比较,one-way ANOVA检验进行多组间比较分析,以P<0.05表示有统计学意义。结果:血清外泌体ERG有淋巴结转移(N1)患者和无淋巴结转移(N0)患者相对表达量分别为(1.23x10-2±1.83x10-3)和(1.01x10-2±1.54x10-3),P<0.05,具有统计学意义;Gleason评分≤7分和Gleason评分>7分相对表达量分别为(9.06x10-2±1.23x10-3)和(1.09x10-2±1.75x10-3),P<0.05,具有统计学意义,T1、T2、T3、T4各期的表达量分别为(8.61x10-3±1.77x10-3)(8.99x10-3±1.26x10-3)(9.51x10-3±1.12x10-3)(1.23x10-2±1.95x10-3)(P<0.05,F=7.374),血清外泌体ERG与T分期相关,具统计学意义。血清外泌体PSMA远处转移(M1)表达量(1.37x10-3±4.72x10-4)高于无远处转移(M0)(1.01x10-3±9.60x10-4),P<0.05,有统计学意义。血清外泌体SPDEF表达与各项指标均无统计学意义。结论:外泌体ERG、SPDEF、PSMA在前列腺癌、前列腺增生、健康对照组三组中的表达量进行分析,发现血清外泌体ERG与淋巴结转(P<0.05)、Gleason评分(P<0.05)、T分期相关(P<0.05);血清外泌体PSMA与有无远处转移(P<0.05);血清外泌体SPDEF表达与各项指标均无统计学意义。