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HIV感染者目前在世界范围内广泛传播,成为二十一世纪最重大的公共卫生事件之一。目前HIV所导致的人获得性免疫缺陷综合征--艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS)的治疗仍然是医学上的难题,现有的治疗手段也太过昂贵,还存在耐药与毒性副作用。人类投入极大的精力与财力进行相关的疫苗研究,迄今为止,还没有临床上可以确定有效的产品面世。AIDS显然不仅是医学上的问题,而且也是社会问题与经济问题。在现在的状况下,对AIDS的早期发现、早诊早治显然是最为重要的一环。对感染者传播可能性的预测,对药物治疗效果的评价,都需要特异性与高灵敏度的诊断方法。目前,检测HIV感染的方法有多种,对p24抗原及其抗体的检测是目前临床筛选HIV感染的最常用方法。p24抗原是艾滋病病毒(HIV)主要的结构蛋白,分子量为24千道尔顿(KD)。p24抗原是HIV的衣壳的主要构成分,每一完整的病毒颗粒含有2000左右的P24抗原分子。在HIV感染人的早期,p24抗原就已经在人体内表达,并且可在血液中被检测到。而后抗p24抗体在血液中出现,因为抗原抗体的中和,p24抗原则难以被检测出来。目前针对p24的检测方法主要是ELISA方法,利用ELISA方法,已经可以检测到血浆中最低10pg/ml的p24抗原,但是这样仍难免假阴性的产生。因此,有必要进一步提高检测的灵敏度。而免疫PCR技术无疑是迄今为止灵敏度最高的检测手段,将免疫PCR方法用于待测样本中p24抗原的检测,理论上可以大大提高检测的灵敏度,因而可以缩短HIV所致AIDS的窗口期,更主要的是用于检测药物治疗的效果,且对血液制品的检测可以大大提高灵敏度且降低检测费用。同时,因目前所用的HIV核酸检测方法,特别是HIV病毒载量的测定费用甚为昂贵,因而利用免疫PCR方法可以间接测定HIV的病毒载量,有可能部分替代当前病毒载量的测定,用于对AIDS病情的预测、感染者对他人的传染力的评估,为AIDS的防治提供有力的医学科技手段。指数富集配体系统进化技术(SELEX, Systematic Evolution of Ligand by Exponential Enrichment)是近20年来出现的一种新型体外筛选技术。该技术将文库技术与筛选技术相结合,从核酸文库中筛选出的一段核酸分子:配基—适配子(aptamer);适配子与抗体类似,可以与相应靶物质特异性结合。SELEX技术筛选适配子的技术有快速的进步,而适配子也被应用到医学生物学等各个方面。在HIV等病毒学研究与治疗方面,SELEX的应用也有了可观的进展,多种病毒的相关适配子被筛选出来,为病毒相关疾病的防治提供了新的方向。本论文第一部分、第二部分主要运用经典的免疫PCR技术、及SELEX技术进行HIV-1p24抗原适配子的筛选;对所筛选到的适配子进行亲和力及特异性的检测;并应用适配子对HIV阳性血样及健康人对照进行基于适配子的免疫PCR检测,以确定适配子在检测P24抗原方面的应用。人乳头瘤病毒(HPV)为双链DNA病毒,是最早被确定为人类肿瘤的致病因子,特别是与女性宫颈癌的关系密切。目前已经发现的HPV型别达到200余种,据其致人类肿瘤的风险程度分为高危型与低危型。在我国大陆,HPV16及HPV18型是最主要的高危型别病毒。我国的宫颈癌等肿瘤多数与这两个型别密切相关。对病毒相关的肿瘤,我国最早由曾毅院士建立了针对鼻咽癌的血清学诊断方法。通过对EB病毒的相关抗体的检测,已经建立了极为有效的早期筛查鼻咽癌的方法,对鼻咽癌这一恶性肿瘤的防控做出了卓越的贡献。逻辑上,同为DNA肿瘤病毒的HPV,也应当能够找到相应的血清学诊断指标,用于HPV相关恶性肿瘤的早期诊断、人群筛查。为此,本论文第二部分进行HPV感染血清学检测。选用大陆地区最常见的高危型HPV16、HPV18抗原抗体为检测对象。构建两种最常见高危型人乳头瘤病毒HPV16及HPV18的癌抗原E6E7蛋白表达载体。分别进行原核及真核表达。对临床宫颈癌血样进行检测。建立稳定表达基因优化的E6E7抗原的细胞,采用免疫酶方法对血清样本中的相应抗HPV E6E7抗体进行检测:原核表达基因优化的HPV E6E7抗原,拟对血清中的样本进行检测。