【摘 要】
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肉毒神经毒素是已知毒力最强的天然蛋白质,分A、B、C、D、E、F和G七型,其中A、B、E和F型引起人类肉毒中毒.该研究选取肉毒神经毒素的保守序列设计了一对简并引物,对18株肉毒
【出 处】
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中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院
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肉毒神经毒素是已知毒力最强的天然蛋白质,分A、B、C、D、E、F和G七型,其中A、B、E和F型引起人类肉毒中毒.该研究选取肉毒神经毒素的保守序列设计了一对简并引物,对18株肉毒梭菌和8株相关梭菌进行了检测,表明该引物可特异扩增A、B、E、F和G型肉毒梭菌及产E型肉毒神经毒素的丁酸梭菌,产物为264bp,敏感性达10pg细菌DNA.分别采用酚-氯仿抽提法、固相载体捕获法和直接热裂解法处理产毒菌株培养物,以制备模板,比较扩增效果,发现热裂解法具有安全、简便、快速等优点,适于对产毒梭菌的检测.10倍系列稀释A、B、E和F型肉毒梭菌培养物与蘑菇、玉米、鱼、火腿、香肠、牛奶、梨、蜂蜜、豆豉和花生酱10种食品混合,制备模拟标本,采用热裂解法制备模板,检测标本中细菌的敏感性(个菌/每克食品)为10<6>-10<8>.标本经24小时增菌培养后,检测敏感性增至10-10<3>.以上结果显示出本方法应用于检测食品中引起人类肉毒中毒的梭菌的良好前景.
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