论文部分内容阅读
[目的]采用海人酸致痫SD大鼠模型,通过腹腔注射ALK5抑制剂(SB431542)干扰ALK5受体,观察癫痫大鼠海马组织中ALK1及其下游分子p-Smad1的mRNA及其蛋白的表达,研究癫痫大鼠ALK5对ALK1受体的作用,探讨可能的干预癫痫发作的新靶点。[方法]红藻氨酸(kainic acid, KA)侧脑室注入SD大鼠制备癫痫模型,随机分为KA模型对照组(A组)、ALK5 Inhibitor腹腔注射3d组(B组)、ALK5 Inhibitor腹腔注射7d组(C组),另设假手术组为生理盐水对照组(NC组),每组各10只。NC组、A组、B组分别于第3d,C组于第7d取海马,检测海马组织中ALK1和p-Smad1的mRNA及其蛋白的表达。[结果](1)免疫荧光组化结果显示：模型对照组ALK1和p-Smadl蛋白表达量较空白对照组表达增高(P<0.05),ALK5 Inhibitor腹腔注射3天组和7天组ALK1和p-Smadl蛋白表达量较模型对照组表达降低(P<0.05)。各组的ALK1蛋白AOD值分别为：对照组(0.11±0.05),模型组对照组(0.17±0.04),ALK5 Inhibitor腹腔注射3天组(0.11±0.05),ALK5 Inhibitor腹腔注射7天组(0.08±0.04)；各组的p-Smadl蛋白AOD值分别为：对照组(0.07±0.03),模型组对照组(0.12±0.04), ALK5 Inhibitor腹腔注射3天组(0.09±0.02),ALK5 Inhibitor腹腔注射7天组(0.08±0.02)。各模型组ALK1和p-Smadl蛋白表达量与对照组比较差异具有显著性(P<0.05),模型组对照组与ALK5 Inhibitor腹腔注射3天组比较差异具有显著性(P<0.05),模型组对照组与ALK5 Inhibitor腹腔注射7天组比较差异具有显著性(P＜0.05), ALK5Inhibitor腹腔注射3天组与ALK5 Inhibitor腹腔注射7天组比较无显著性差异(P>0.05)。(2)荧光PCR结果显示：模型对照组ALK1和p-Smad1基因表达量较对照组表达增高(P<0.05),ALK5 Inhibitor腹腔注射3天组和7天组ALK1和p-Smad1基因表达量较模型对照组表达降低(P<0.05)。各组的ALK1基因相对表达倍数分别为：对照组(1.00±0.00),模型组对照组(3.34±1.52),ALK5Inhibitor腹腔注射3天组(0.94±0.81),ALK5 Inhibitor腹腔注射7天组(0.92±0.42)；各组的p-Smad1基因相对表达倍数分别为：对照组(1.00±0.00),模型组对照组(1.93±0.72),ALK5 Inhibitor腹腔注射3天组(0.98±0.13), ALK5 Inhibitor腹腔注射7天组(0.95±0.06)。各组模型组与对照组比较差异具有显著性(P<0.05),模型组对照组与ALK5 Inhibitor腹腔注射3天组比较差异具有显著性(P<0.05),模型组对照组与ALK5 Inhibitor腹腔注射7天组比较差异具有显著性(P<0.05),ALK5 Inhibitor腹腔注射3天组与ALK5 Inhibitor腹腔注射7天组比较无显著性差异(P>0.05)。[结论](1)ALK5抑制剂腹腔注射后导致KA诱导的SD癫痫大鼠ALK1受体和p-Smad1表达下调。(2) TGF-β1—ALK5-p-Smad2/3对TGF-β1—ALK1-p-Smad1/5具有促进作用。