严重感染是烧伤患者死亡的重要原因。烧伤后炎症介质的大量释放、创面细菌的入侵、局部组织毒素的吸收等因素可诱导机体SIRS甚至MODS的发生,其中,烧伤创面被认为是烧伤患者的主要致炎因素。机体受到创伤时,局部创面坏死组织,不但是感染发生的温床,其形成的“组织毒素”还可以诱发诸多的病理生理变化。在临床中,无论是急性创面患者还是慢性创面患者,伤口局部或多或少地都会存在坏死组织分解产物,当创面较广泛且伴有感染时,如在大面积深度烧伤、严重电击伤或严重糖尿病足、慢性创面伴有大量湿性坏死的患者中,这种创面坏死组织分解产物的量更为尤甚。人们观察到这些严重病人往往出现炎症反应综合征(SIRS),更有甚者出现DIC、MODS,这提示外部有对机体有毒的物质由创面吸收入血,从而诱导了SIRS的发生。以上的现象给予我们提示:当创面存在大量的、充满异味的坏死组织时,其分解产物被吸收入血后,往往对机体产生一定的损害,严重时可危及生命。对于这些毒性物质,称之为“组织毒素”,至于它的构成至今众说不一,有云是“脂蛋白复合物(LPC)”,也有称是“脂质过氧化物(LPO)”的,甚至还有称是中分子物质、变性蛋白等。不管怎样,这些创面坏死组织分解物质总是和内毒素混杂在一起。现在已确认革兰阴性杆菌产生的内毒素是引发机体全身炎症反应的元凶,防治革兰阴性杆菌以抑制脓毒症的发生已成为临床的共识,但不知坏死组织分解物本身能否导致全身性炎症反应?如果能,它与内毒素有何关系?两者对机体炎症系统的影响有何异同?　　第一部分探讨创面坏死组织分解物是否对机体炎症因子产生明显影响　　研究目的：　　研究通过分别建立两种毒性物质经家兔腹腔吸收模型,动态检测血液炎症因子的浓度变化,对比分析坏死组织分解物与内毒素两种毒性物质对机体炎症因子影响的异同,探讨分析坏死组织分解物对机体炎症因子的影响特点。　　实验步骤与方法：　　成年新西兰兔30只,体重2.2±0.3Kg,按随机数字表法将实验兔分成盐水组、匀浆液组、内毒素组,每组各10只,实验开始前实验兔预先饲养1周。实验开始时分别于各组实验兔耳中央动脉抽取2ml血液标本,然后分别往生理盐水组实验兔腹腔注射生理盐水1ml/kg,匀浆液组腹腔注射无菌匀浆液1ml/kg,内毒素组腹腔注射内毒素40EU/ml/kg,腹腔注射后,分别于2h、6h、12h、24h、30h、36h、48h、60h于实验兔耳中央动脉抽取2ml血液标本,常温静置2h后,2000r/min离心10min,取上清液,标本置于-70低温冰箱冻存待检。血清标本按照ELISA试剂盒的要求进行处理,采用双抗体夹心法检测血清中肿瘤坏死因子-α、白介素-1、白介素-6的浓度。数据以x±s表示,采用SPSS13.0统计学软件重复测量数据方差分析对三组炎症因子结果进行统计分析,两两比较用SNK法,根据炎症因子含量的变化曲线采取Cubic模型曲线拟合,绘制对比图形,进行spearman相关分析。　　实验结果：　　1、坏死组织匀浆液组腹腔注射后很快可见血清TNF-α、IL-1、IL-6含量升高,12h以后达到高峰期,其峰值分别为TNF-a(302.38±69.04)pg/ml、IL-1(502.28±42.11)pg/ml、IL-6(231.25±22.08)pg/ml,36h后开始出现回落。生理盐水组炎症因子浓度在观察期间无明显变化,两组(匀浆液vs盐水)各项指标均呈非常明显差异[TNF-a(181.20±23.55)pg/mlvs(78.13±8.25)pg/ml,p<0.01;IL-1(322.71±56.48)pg/mlvs(213.75±6.57)pg/ml,p<0.01、IL-6(204.41±15.93)pg/mlvs(137.64±4.92)pg/ml,p<0.01];　　2、坏死组织匀浆液组中炎症因子的上升时间早于内毒素组(2-4hvs5-6h),并且部分炎症因子在峰值期间(30h)较内毒素组明显增高[IL-1(502.28±42.11)pg/mlvs(387.89±23.20)pg/ml,p<0.05;IL-6(231.25±22.08)pg/mlvs(161.13±20.24)pg/ml,p<0.05];　　3、曲线拟合中匀浆液组中炎症因子浓度变化曲线明显有别于内毒素组。　　小结：　　创面坏死组织分解物可以诱导机体炎症介质的升高,其诱发机体炎症因子反应过程有别于单纯内毒素,其可能含有某些不同于、甚至强于单纯内毒素毒性的、能引起机体炎症反应的有害物质。　　在第一部分实验中,我们发现创面坏死组织分解物可诱导机体炎症因子不同程度的升高,并且其诱发炎症因子的反应过程有别于内毒素,提示坏死组织分解物中可能含有某些不同于、甚至强于单纯内毒素毒性的、能引起机体炎症反应的有害物质。由于坏死组织分解物中含有的成分较多,具有生物活性的物质以多胺为主,特别是腐胺与尸胺,因此,为进一步深入探讨坏死组织分解物中何种物质能够引起如此强烈的炎症因子反应,揭示坏死组织分解物中主要损害物质,本文设计并进行了更进一步的实验研究。　　第二部分探讨创面坏死组织分解产物中诱导血清炎症因子的主要损害物　　研究目的：　　研究通过分别建立三种毒性物质经家兔腹腔吸收模型,动态检测血液中炎症因子的浓度变化,对比分析坏死组织分解产物中对机体炎症因子影响起主导作用的物质,理清局部坏死与全身损害的关系,为临床开展积极有效的预防和治疗提供理论依据。　　实验步骤与方法：　　成年新西兰兔40只,体重2.2±0.3Kg,按随机数字表法将实验兔分成盐水组、匀浆液组、腐胺组、尸胺组,每组各10只,实验开始前实验兔预先饲养1周。实验开始时分别于各组实验兔耳中央动脉抽取2ml血液标本,然后分别往生理盐水组实验兔腹腔注射生理盐水1ml/kg,匀浆液组腹腔注射无菌匀浆液1ml/kg,腐胺组腹腔注射1％腐胺1ml/kg,尸胺组腹腔注射1%尸胺1ml/kg,腹腔注射后,分别于2h、6h、12h、24h、30h、36h、48h、60h经实验兔耳中央动脉抽取2ml血液标本,常温静置2h后,2000r/min离心10min,取上清液,标本置于-70℃低温冰箱冻存待检。血清标本按照ELISA试剂盒的要求进行处理,采用双抗体夹心法检测血清标本中肿瘤坏死因子-α、白介素-1、白介素-6的浓度。数据以x±s表示,采用SPSS13.0统计学软件重复测量数据方差分析对三组炎症因子结果进行统计分析,两两比较用SNK法,根据炎症因子含量的变化曲线采取Cubic模型曲线拟合,绘制对比图形,进行spearman相关分析。　　实验结果：　　1、腐胺组及尸胺组经腹腔注射后很快可见血清中炎症因子TNF-α、IL-1、IL-6含量不同程度的升高,与盐水组呈显著性差异[腐胺组TNF-α(236.34±28.53)pg/mlvs盐水组(78.13±8.25)pg/ml,F25.20,p<0.01];[尸胺组TNF-α(423.12±115.74)pg/mlvs盐水组(78.13±8.25)pg/ml,F25.20,p<0.01];　　2、腐胺组中血清炎症因子开始上升的时间与坏死组织匀浆液组较为接近(3-4hvs3-5h),比尸胺组较为延迟(3-4hvs2h),峰值比低于尸胺组[TNF-α(338.60±35.61)pg/mlvs(475.87±85.72)pg/ml,F5.11,p<0.01;IL-1(518.10±44.24)pg/mlvs(539.44±22.59)pg/ml,F1.90,p<0.05;IL-6(265.89±33.54)pg/mlvs(309.40±27.14)pg/ml,F5.56,p<0.01],并且炎症因子到达峰值时间晚于尸胺组(12-15hvs8-12h),峰值持续时间也短于尸胺组(12-36hvs8-36h);　　3、曲线拟合显示腐胺组中炎症因子浓度变化曲线有别于尸胺组却近似于匀浆液组,统计学显示腐胺与匀浆液相关性更为显著(p<0.01)。　　小结：　　创面坏死组织分解物、腐胺、尸胺均可以诱导机体炎症介质的升高,其中同等剂量下的尸胺对机体炎症因子激发的效应最强,腐胺次之,坏死组织匀浆液最弱;腐胺诱导机体炎症反应的曲线趋势与坏死组织匀浆液较为接近,在坏死组织分解产物诱导机体炎症介质的升高过程中可能占居着主导作用。　　结论：　　一、创面坏死组织分解物可诱导机体炎症因子的释放。　　二、创面坏死组织分解物诱发机体炎症因子反应过程有别于单纯内毒素,其含有不同于、甚至强于单纯内毒素毒性的、能引起机体炎症反应的有害物质。　　三、外源性腐胺和尸胺都可引起机体炎症反应,其中腐胺诱导机体炎症反应与坏死组织匀浆液趋势较为接近,在坏死组织分解产物诱导的炎症反应中可能起着更重要的作用。　　四、既往大家所关注的更多的是局部受到的损害及其程度,但创面特别是慢性创面对全身的影响应同时受到足够的重视。