经筋微创疗法治疗早中期KOA临床疗效及对TLR4信号转导通路的影响

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:guanxinpp
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目的:1.通过回顾性分析经筋微创疗法治疗108例早中期膝骨性关节炎(KOA)的近、远期效果,探讨经筋微创疗法治疗早中期膝骨性关节炎的临床优越性。2.通过对KOA患者治疗前及治疗12周后的滑膜组织TLR4/MYD88/NF-κ B信号转导通路的实验研究,在细胞分子、基因表达水平验证经筋微创疗法治疗KOA有确切疗效。方法:1.选取符合ACR制定的KOA诊断标准且根据X线影像学分级标准(Kellgen和Lawrence)X线分级属于Ⅰ-Ⅲ级的KOA患者,根据纳入、排除、剔除和脱落标准,选择符合研究要求的108例早中期KOA患者(163膝),行经筋微创治疗,并进行临床随访。应用骨关节炎指数评分,分别于治疗后1月、1年、2年、3年、4年、5年进行疗效评估。2.根据病例选择标准入组符合实验要求的病人,同一患者在经筋微创治疗前及治疗12周后,分别于针刀镜术中获取病变关节内的滑膜组织标本,分别进行以下实验:①HE染色观察滑膜增生、炎症浸润及间质纤维化情况;②RT-PCR检测IL-1β、IL-6、IL-8、MMP-13 基因表达,Western Blot 检测 TLR4/MYD88/NF-κB 的蛋白含量,免疫组化实验检测滑膜组织中TLR4/MyD88/NF-κ B/MMP-13的蛋白含量。对实验结果进行统计学分析。结果:1.临床研究:经筋微创疗法治疗早中期K0A治疗后疼痛、僵硬、活动功能及WOMAC总分均较治疗前降低;治疗后1月、1年、2年、3年、4年、5年总有效率分别为98.9%、96.7%、95.6%、87.9%、83.5%、78.0%。2.实验研究:①经筋微创治疗后组中滑膜增生、炎症浸润及间质纤维化较治疗前组明显降低;②治疗后滑膜组织中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、MMP-13等炎症因子的基因表达均较治疗前有不同程度的下调,且两组比较有显著差异,有统计学意义(P<0.05);治疗后滑膜组织中TLR4、MyD88、p-NF-κ B、p-I κ B-α的蛋白表达较治疗前明显降低,且两组比较差异显著有统计学意义(P<0.05);而治疗前后NF-κB、IκB-α蛋白表达无显著统计学意义(P>0.05);免疫组织实验结果显示,治疗前滑膜组织中TLR4、MyD88、MMP-13、p65、IKB-α反应呈棕黄色,且着色细胞较多,分布密集;而治疗后滑膜组织反应呈淡黄色,着色细胞数量较少,分布稀疏;免疫组化半定量分析显示,治疗后TLR4、MyD88、MMP-13、p65、IκB-α蛋白表达较治疗前降低,且两组差异显著具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.临床研究:经筋微创疗法治疗早中期K0A的远期疗效确切,以5年为终点的临床随访发现该疗法可延缓病程进展,具有较好远期疗效。2.实验研究:经筋微创疗法可有效缓解滑膜组织炎症浸润、滑膜增生、间质纤维化水平,降低滑膜组织中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、MMP-13基因表达水平及滑膜组织中TLR4/MyD88/p65/I κ B-α/p-I κ B-α的蛋白含量,其通过调控TLR4信号转导通路,抑制下游MYD88、NF-KB,阻断炎性细胞因子的分泌,减轻滑膜炎症,缓解临床症状,延缓KOA病程进展,在细胞分子、基因表达水平验证经筋微创疗法治疗KOA有确切疗效。
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