复杂成分的快速分离与活性检测是研究天然产物的难点问题,本文以茶叶水提物为研究对象,首次采用三种在线串联液相色谱技术实现了对茶叶复杂成分的在线分离制备及其抗氧化活性成分的筛选。首先,根据分子排阻色谱和反相色谱不同的分离机理,本研究采用Sephadex LH-20中压柱作为第一维柱,以C18制备色谱柱作为第二维柱,构建了具有正交性的全二维在线中压液相×制备型高效液相色谱的制备液相色谱系统(MPLC×prep-HPLC)。通过该系统一次性分离制备得到18个成分,结合核磁和质谱数据进行结构表征,鉴定了16个化合物,显示出很高的分离效率。然后,在一维柱后稀释-富集柱富集的切换接口的基础上,构建在线逆流色谱×制备型高效液相系统(CCC×prep-HPLC)。CCC作为第一维分离柱,C18制备柱作为第二维分离柱,并采用双水相溶剂体系-异丙醇/16%氯化钠溶液(1：1.2,v/v)为CCC的溶剂体系。在最佳的分离条件下,通过采用上述的CCC×prep-HPLC系统,从茶叶水提物中一次性分离制备得到了18个成分,其中鉴定了10个化合物,表明此系统可以快速有效地用于茶叶复杂成分的分离和制备。最后,采用快速高效的HPLC-FRAP在线抗氧化活性筛选方法对六种茶叶水提物的抗氧化活性成分进行检测。在二维分离制制备得到的已知化合物的基础上,对铁观音茶叶的抗氧化活性成分进行鉴定,确定了8个抗氧化活性成分,其中儿茶素(EC)和表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)为其主要的抗氧化活性成分。