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目的:本实验通过沉默Twist基因表达,分析宫颈癌Caski细胞中Bcl-2蛋白的表达及化疗敏感性的影响。方法:通过生物信息学方法分析针对干扰Twist基因表达的载体序列,证实Twist基因干扰序列已经构建成功;利用脂质体lipofectamin2000将重组干扰载体转染至宫颈癌Caski细胞,建立稳定低表达Twist基因的重组细胞系;RT-PCR检测各组细胞系中Twist基因的mRNA表达水平;不同浓度的紫杉醇处理低表达Twist基因的重组细胞系48h后,MTT检测细胞生长抑制率,筛选出最佳抑制浓度;Western blot检测低表达Twist基因的重组细胞系中Bcl-2蛋白的表达情况。结果:1.成功构建低表达Twist基因的重组细胞系Caski-Twist-shRNA。2.四个不同干扰载体转染组中,四组细胞Twist-mRNA表达均下降,转染组2Twist-mRNA表达下降最明显,与其它三组相比,差异有显著性(P<0.05),表明转染组2的转染率最高;4个转染组与未转染组或空白载体转染组相比,其Twist-mRNA表达下降,差异有显著性(P<0.05);未转染组和空白载体转染组比较无显著性差异(P>0.05)。3.随着紫杉醇浓度的增加,三组细胞的生长抑制率也相应增加,且转染组细胞的生存率均低于未转染组或空白载体转染组,未转染组、空白载体转染组和实验组的IC50值分别为5.86μM、1.06μM和6.80μM;转染组的IC50值较空白载体转染组或未转染组明显增高(P<0.05)。4. Caski-Twist-shRNA中Bcl-2蛋白表达明显下调,与未转染组或空白载体转染组比较,差异有显著性意义(P<0.05),空白载体转染组与未转染组蛋白表达无明显差异(P>0.05)。结论:1.Twist基因表达下调,宫颈癌Caski细胞对紫杉醇敏感性增强。2.Twist基因表达降低,导致Caski细胞对紫杉醇敏感性增加,可能与Bcl-2的下调有关。