树突状细胞参与内耳免疫反应的实验研究

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目的:由于血脑和血迷路屏障存在,脑和内耳曾被认为是免疫豁免器官。后来的研究表明内淋巴囊在内耳免疫应答中具有重要作用,体循环中的抗体、免疫活性细胞可循此途径进入内耳。DC是目前发现的功能最强的专职抗原提呈细胞,启动免疫应答显著刺激初始型T细胞增殖,决定着免疫应答的方向,在免疫反应中起着举足轻重的作用。本研究拟探讨DC是否参与了内耳的免疫反应,在内耳的这种反应中神经免疫和自身免疫与细胞免疫之间有相互影响,这种影响对内耳的形态和功能是否有保护作用。 方法: 1.首先建立了利用大鼠骨髓细胞诱导DC及其纯化的方法。利用电镜、流式细仪检测、混合淋巴细胞培养对培养的DC进行表型和功能学的检测,5ng/ml GM-CSF和IL-4组合可以获得纯度较高、表型和功能较好的DC。通过RT-PCR法检测激素对树突状细胞表达P物质受体的的抑制作用。扩增产物在含溴化乙啶的1%的琼脂糖凝胶中电泳,以GAPDH为内参照半定量SPR的表达变化。利用免疫组化的方法观察S-100β在大鼠内耳的分布。
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