论文部分内容阅读
目的：大量研究表明PPARα能够调节许多脂肪酸氧化相关酶基因的表达。低氧能够引起机体对脂肪酸氧化的依赖增多,但研究的结果不尽相同。本文通过研究AMPKα2基因高表达鼠和AMPKα2基因敲除鼠在进行四周常氧耐力训练、低氧刺激以及低氧耐力训练后,骨骼肌AMPKα1/α2磷酸化蛋白含量、PPARα核蛋白含量以及PPARα mRNA含量的变化,探讨耐力训练、低氧刺激以及低氧训练下AMPKα2的高表达和敲除对PPARα的影响,以进一步了解耐力训练以及低氧耐力训练对骨骼肌脂肪酸氧化调节的分子机制。方法：C57BL/6J野生小鼠、AMPKα2基因高表达鼠和AMPKα2基因敲除鼠各40只,按体重各随机分为4组：常氧安静对照组,常氧耐力训练组,低氧安静对照组,低氧耐力训练,共12组,每组10只。耐力训练组小鼠训练方案为：每天进行1小时坡度为0,速度为12m/min fl勺跑台训练,每周6天.持续4周。低氧方案为：每天间歇性低氧8小时,模拟海拔4500m左右的低氧环境。训练组小鼠最后一次训练后12小时取材。Western blot法测定AMPK (Thr72)磷酸化水平、PPARα核蛋白含量。Real-Time PCR法测定PPARα mRNA含量。结果：(1)在间歇性低氧及低耐力训练四周后,三种不同基因型小鼠骨骼肌AMPKα1/α2(THR172)磷酸化水平都提高。(2)低氧耐力训练四周后,三种不同基因型小鼠骨骼肌PPARα核蛋白表达都增加。(3)与WT鼠相比,低氧耐力训练显著增加0E鼠AMPKα磷酸化蛋白和PPARα核蛋白表达,显著降低KO鼠AMPKα磷酸化蛋白和PPARα核蛋白表达。结论：(1)四周低氧耐力训练引起AMPKα2三种基因型鼠骨骼肌AMPK磷酸化增加,进一步证实了AMPK在维持细胞能量代谢中发挥着重要作用。(2)低氧耐力训练四周后,野生鼠骨骼肌PPARα核蛋白显著增加。说明低氧耐力训练能够引起小鼠骨骼肌PPARα核蛋白的活动增加。(3)在四周低氧训练的影响下,与野生鼠相比,AMPKα2基因高表达鼠骨骼肌PPARα核蛋白表达显著增加；AMPKα2基因敲除达鼠骨骼肌PPARα核蛋白水平呈现显著下降。提示在低氧训练的影响下,AMPKα能够促进PPARα核蛋白的表达。