8-硝基白杨素诱导体外培养人宫颈癌Hela细胞生长抑制和凋亡作用研究

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目的探讨白杨素(Chrysin)衍生物8-硝基白杨素(5,7-dihydroxy-8-nitrorchrysin, 8-NOChR)抑制体外培养人宫颈癌Hela细胞增殖和诱导凋亡作用。方法体外培养人宫颈癌(Hela)细胞系细胞,MTT比色法测定Hela细胞增殖活性。细胞计数法测定HeLa细胞存活率,绘制细胞生长曲线。PI染色FCM法分析对Hela细胞凋亡的影响。AO/EB染色荧光显微镜观察Hela细胞凋亡形态学改变。DNA凝胶电泳观察梯形DNA条带。Western blot法测定对HeLa细胞NF-κB,bcl-2,bax,的表达和活性的影响。结果MTT比色测定显示,8-NOChR显著抑制Hela细胞增殖,呈浓度依赖性;其IC50值为4.53μM。细胞计数法测定表明8-NOChR有效抑制HeLa细胞生长,呈剂量依赖性。FCM分析表明8-NOChR诱导Hela细胞凋亡,呈浓度依赖性。AO/EB染色荧光显微镜观察发现,8-NOChR诱导Hela细胞呈现典型凋亡细胞形态特征。8-NOChR(30μM)处理Hela细胞72h,琼脂糖凝胶电泳出现“梯形”DNA条带。Western Blot法分析结果表明:8-NOChR下调Hela细胞NF-кB、bcl-2蛋白表达,同时上调bax蛋白表达。结论(1)8-NOChR具有抑制人宫颈癌Hela细胞增殖和诱导细胞凋亡作用。(2)抑制NF-кB活化,下调Bcl-2蛋白表达可能是8-NOChR诱导人宫颈癌Hela细胞生长抑制和凋亡的分子机制之一。
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