【摘 要】
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目的: 妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)是指妊娠期出现的糖尿病或者糖耐量异常。随着病程的进一步发展可发生妊娠期高血压疾病等合并症对母婴健康的危害非
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目的: 妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)是指妊娠期出现的糖尿病或者糖耐量异常。随着病程的进一步发展可发生妊娠期高血压疾病等合并症对母婴健康的危害非常严重,及时发现和预防治疗可以减少围生儿患病率、致畸率及病死率。本研究通过建立妊娠糖尿病大鼠模型,探讨建立模型的最佳剂量;从表达生命特征、动态描述基因调节的蛋白质入手,对胚胎肝脏进行蛋白质组学研究,寻找妊娠糖尿病胚胎肝脏的差异蛋白质,从蛋白质水平上探讨妊娠糖尿病对胚胎肝脏及其他器官发育的影响。 方法: 1.SD大鼠按雄雌比例1∶2合笼过夜,镜检见精子者计为妊娠0d(E0.5),标记孕鼠并计算孕期,将55只(假孕大鼠不计入)孕鼠随机分成3组。孕期第6天(E6.5),实验组分别用45mg/kg(D45)和55mg/kg(D55)的STZ一次性腹腔注射,对照组用等量的枸橼酸盐缓冲液代替,处理前禁食12h。观察大鼠空腹血糖、尿糖、成模率、死亡率及转阴率和母鼠流产、胚胎畸形的情况; 2.双向电泳分离正常对照组和妊娠糖尿病胚胎肝脏的蛋白质;Image Master2DPlatinum6.0软件对电泳图谱进行分析,寻找表达差异蛋白点; 3.对差异蛋白点进行LC-MS/MS质谱鉴定; 4.生物信息学分析差异蛋白点的功能,综合探讨妊娠糖尿病对胚胎肝脏发育的影响。 结果: 1.成功建立妊娠糖尿病模型,大鼠出现血糖升高、“三多一少”。与对照组相比,实验组空腹血糖、尿糖均明显升高;母体流产和胚胎发育畸形率明显升高。 2.妊娠糖尿病大鼠胚胎肝脏有差异表达蛋白。在肝脏中鉴定了14个蛋白,分别与能量代谢、细胞增殖、内质网应激及氧化相关。 结论: 1.腹腔注射STZ45mg/kg成模率高,死亡率低,转阴率低;同时母体流产及胚胎畸形情况更符合实验研究要求。本研究中,STZ45mg/kg是建立妊娠糖尿病大鼠模型的理想剂量。 2.在胚胎肝脏中发现的差异蛋白主要与细胞增殖和氧化应激相关,其表达与妊娠糖尿病对胚胎发育有关,但具体信号通路有待进一步研究;与之相关的蛋白有望为研究妊娠糖尿病对胚胎肝脏发育影响提供实验基础。
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