早熟禾和黄豆DNA的提取及与苯噻草胺的相互作用研究

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在查阅大量国内外文献基础上,用紫外分光光度法研究了苯噻草胺与早熟禾和黄豆DNA的相互作用,提出了新的除草机理。本论文的主要成果如下: 1.优化了用SDS法提取早熟禾DNA的最佳实验条件,细胞提取液用量为4.0 mL,无水乙醇用量为0.4 mL,水浴时间为40 min,饱和NaOAc溶液用量为1.0 mL,苯酚/氯仿/异戊醇溶液用量为样液的体积的0.6倍,氯仿/异戊醇溶液用量为样液体积的0.9倍,异丙醇用量为样液体积的0.7倍。在所选择条件下提取早熟禾DNA,其产率约为381μg/g,A260/A280的值在1.76~1.82之间,纯度高。 2.提取黄豆DNA的最优实验条件是:细胞提取液用量为5.0 mL,无水乙醇的用量为0.5 mL,水浴时间为30 min,饱和KCl溶液用量为1.0 mL,苯酚/氯仿/异戊醇溶液用量为样液体积的0.5倍,氯仿/异戊醇溶液用量为样液体积的0.6倍,异丙醇用量为样液体积的1.0倍。在优化条件下提取黄豆DNA,其产率约900μg/g,A260/A280的值在1.75~1.81之间,纯度高。 3.运用紫外分光光度法研究了苯噻草胺与早熟禾DNA和黄豆DNA的相互作用。当苯噻草胺浓度小于3.08×10-5mol/L时,苯噻草胺几乎不与早熟禾DNA和黄豆DNA作用;当苯噻草胺浓度大于6.16×10-5mol/L时,苯噻草胺与黄豆DNA也发生作用,产生药害。苯噻草胺浓度在3.08×10-5mol/L~6.16×10-5mol/L范围内,苯噻草胺既与早熟禾DNA强烈作用,又几乎不与黄豆DNA作用,可选择性地除草。苯噻草胺可嵌入杂草DNA分子双链中,破坏DNA分子中碱基配对,使DNA双链解开,并且苯噻草胺可进一步与解链后的ss DNA通过氢键结合,形成复合物,这样,便抑制了DNA的复制,从而使杂草死亡。苯噻草胺杀除早熟禾等杂草的合适浓度为3.08×10-5 mol/L~6.16×10-5 mol/L,最合适的温度范围为25℃~30℃,最合适施药期为一叶期至三叶期。
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