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目的:应用双向凝胶电泳蛋白质分离技术(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)及凝胶图像对比分析,对结肠黑变病(melanosiscoli,MC)、结肠癌及正常组织进行蛋白质分离,寻找三者差异表达的蛋白质点,以探索MC的发生、发展及其与结肠癌的相关性。方法:1.采集我院内镜室2013.01-2014.06就诊患者的结肠组织标本,分为MC组7例、结肠癌组6例及正常对照组6例;2.结肠组织样品处理后,取上清液用Bradford方法测定蛋白质浓度;应用2-DE技术进行第一向固相pH梯度等电聚焦电泳(immobilized pH gradient isoelectric focusing,IPG-IEF)及第二向十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)建立MC、结肠癌及正常人结肠组织的双向凝胶图谱。3.应用扫描仪对凝胶扫描获取图像,使用imagemaster 7.0软件分别分析对比MC患者与结肠癌患者及正常人的凝胶图像,筛选出差异表达蛋白质点。结果:1.获取的凝胶图像显示出良好的重复性。各斑点间分离清晰,各组内凝胶在蛋白质斑点位置上均具有较好的重复性,可以进行图像分析;2.结肠癌、MC、正常组织凝胶图像的平均蛋白质斑点数分别为2150±240,1970±138,2028±176。凝胶图谱进行比对后,总共找到置信度在95%以上的差异点14个。MC与正常组织对比有6个差异点,其中4个蛋白点在正常组织中表达量较大,2个点在MC中表达量比较大。仅在MC中表达的蛋白质点有1个(P<0.05);MC与结肠癌组织对比有8个差异点,其中1个蛋白点在MC中的表达量比较大,7个蛋白点在结肠癌组织中的表达量比较大。仅在结肠癌组表达的蛋白质点有2个(P<0.05)。结论:通过2-DE技术及凝胶图像比对分析,分析了MC与结肠癌比较蛋白质组学,发现MC与正常结肠组织之间及与结肠癌组织之间存在差异表达的蛋白质。这可能揭示了MC和结肠癌的发生、发展的生物学行为,为MC的研究提供新思路、新线索。