论文内容主要由文献综述和动物实验两部分组成。一、文献综述综述一主要从现代医学角度阐述了慢性阻塞性肺疾病的发病原因、主要的发病机制和目前主要的治疗手段。综述二将慢性阻塞性肺疾病与传统医学结合起来,阐述了 COPD在传统医学中的病名、病因病机、古代医家的治疗方法和现代医家的继承创新。二、动物实验1.研究目的通过不同剂量益气消癥通络方干预COPD大鼠模型,观察其气道平滑肌、成纤维细胞、上皮细胞、炎症细胞的改变,以及对参与慢性气道炎症反应的JAK/STAT通路相关的 IL-6、JAK1、STAT3、P-STAT3、JAK1mRNA、STAT3mRNA、SOCS3 mRNA 表达的作用,从分子生物学角度探讨益气消癥通络方对于气道重构的作用机制和量效关系,证明益气消癥通络方可以延缓COPD的疾病进程,进而反馈于临床,指导临床用药,丰富中医理论知识。2.实验方法实验动物选用SPF级雄性wistar大鼠,体重范围190-210g,共计60只,分为空白组、模型组、西药组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组共6组,每组随机分配10只大鼠。采用香烟熏烟联合气管插管滴注LPS的方法建立模型,熏烟12周,每天1小时,每4只装一笼放入自制熏烟箱内以保证充分烟雾暴露,第2、14、21天气道内滴注LPS,滴注LPS当天不熏烟、不灌胃、不雾化。熏烟第一天开始中药组分别按高、中、低剂量进行灌胃,模型组、西药组分别用生理盐水灌胃,西药组进行布地奈德雾化,每周称量体重以调整灌胃剂量和雾化时间。空白组无干预。实验第84天处死大鼠,留取肺组织和血清标本,1IE染色观察肺组织(气道、肺实质)的结构改变,主要观察结构细胞如气道平滑肌细胞、成纤维细胞、上皮细胞和功能细胞如中性粒细胞、淋巴细胞等细胞的改变情况,Elisa方法检测血清中的IL-6得表达情况,采用免疫组化检测手段检测JAK1、STAT3、P-STAT3蛋白的表达情况,逆转录PCR方法检测:JAK1mRNA、STAT3mRNA、SOCS3 mRNA基因的表达情况。最后用SPASS20.0进行数据统计分析,观察益气消癥通络方作用。3.研究结果3.1大鼠一般情况的比较空白组大鼠:体型较其他组别明显大,毛色鲜亮有光泽,精神状态好,活泼好动,进食饮水量大,大便正常,口腔未见明显分泌物,无咳嗽、喘息等呼吸道症状,舌红润。模型组大鼠:体型相对偏小,皮毛部分脱落,毛色暗淡无光,精神状态差,目光暗淡,不喜活动,饮食进水量较少,大便偏干或不成形,口腔可见明显分泌物,咳嗽频数,可闻及喘息气促声,偶见眼眶出血,舌色暗红有瘀血。其他各干预组大鼠:体型与模型组相当,活动量较空白组少,精神可,口腔可见少量分泌物,偶见眼眶出血,中药高剂量组大便不成形,其他组大便质地正常。中药高剂量组进食饮水较其他组略少,其他组进食饮水正常。3.2大鼠肺功能结果比较中药各组和西药组对延缓肺功能下降起到不同程度的作用,对于FEV0.2/FVC、FEV0.2、FVC指标下降的延缓作用,中药中剂量组效果相对较好(P<0.05具有统计学意义),在延缓PEF指标方面,西药组效果较好(P<0.05具有统计学意义)。3.3大鼠肺组织HE染色结果比较除空白组外其他各组大鼠肺组织存在炎性浸润和气道黏膜充血,气管壁、肺泡结构破坏,肺大泡形成,平滑肌细胞、杯状细胞和成纤维细胞增生,与模型组相比,西药组和中药各组严重程度较轻,说明药物干预的有效性,同时西药组在气道和肺泡炎症反应及结构破坏方面程度均最轻,明确了布地奈德雾化疗效,同时中药中剂量组在改善气道炎症,减轻气道黏膜和肺泡破坏程度方面效果良好,有很大的发展潜力。3.4 大鼠 IL-6 炎症因子,JAK1、STAT3、P-STAT3 蛋白,JAK1mRNA,STAT3mRNA 基因表达结果比较各治疗组IL-6的表达情况均高于空白组,低于模型组,说明了布地奈德雾化治疗和益气消癥通络方治疗的有效性,中药低剂量组数值高于中药中高剂量组和西药组,在抑制IL-6表达方面效果不如上述三组。同时中药中、高剂量组和西药组差异不明显。在RT-PCR检测方面,中药各组及西药组均能抑制JAK1mRNA,STAT3mRNA的过度表达,促进SOCS3mRNA的表达从而减轻炎症反应,其中中药中剂量组和西药组效果较好,差异具有统计学意义(P<0.05)三、研究结论中等剂量益气消癥通络方能够改善大鼠咳嗽喘息、黏液分泌、体重减轻等一般情况,能够通过抑制 IL-6、JAK1、STAT3、JAK1mRNA、STAT3mRNA 的表达,促进 SOCS3mRNA 的表达从而抑制慢性炎症反应,进而减缓减轻气道和肺泡的破坏程度,延缓气道阻塞的进程,部分改善肺功能。