盐酸千金藤碱逆转K562/ADR的多药耐药性及其与Bcl-2和P210~(bcr/abl)的关系

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目的 肿瘤化疗是治疗肿瘤的重要手段,而肿瘤细胞对抗癌药物产生耐药性,尤其是多药耐药性(Multidrug resistance,MDR)是当今肿瘤治疗的一大难题。近年来,国内外研究表明细胞凋亡抑制因子Bcl-2、P210bcr/abl参与了肿瘤耐药的形成。盐酸千金藤碱(Cepharanthine Hydrochlorid,CH)是从防己科千金藤属植物的块根中提取分离的一种双苄基异喹啉类单体化合物,具有较强的多种生物活性。最近国外研究显示其具有逆转多药耐药的作用,其能否逆转白血病细胞的多药耐药且机制是否与Bcl-2及P210bcr/abl有关,目前尚未见报道。本实验采用细胞和分子生物学的检测方法,观察CH对肿瘤细胞耐药性的逆转作用,并对MDR的分子机制进行深入探讨。 方法 实验选择人慢性粒性白血病细胞株K562及由阿霉素(Adriamycin,ADR)诱导的具有稳定MDR表型的耐阿霉素细胞株K562/ADR。采用MTT(3—(4,5—dimethylthiazol)-2,5-diphenylte-2H-tetrazoloum bramide,MTT)分析法,测定ADR单用及分别与CH、维拉帕米(Verapamil,VER)合用对K562、K562/ADR细胞的直接细胞毒作用;采用免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)法测定K562、K562/ADR细胞内Bcl-2的表达,以及药物对Bcl-2表达水平的影响:从K562、K562/ADR细胞中提取总蛋白,采用考马斯亮兰G-250染色法测定总蛋白含量;采
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