大孔吸附树脂分离姜油树脂中的姜酚

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以超临界CO2提取的姜油树脂为原料,采用柱层析法分离其中的有效成分姜酚。选用大孔吸附树脂作为固定相,乙醇-水体系作为流动相。考察了相关因素对分离效果的影响,并对所得姜酚样品做了进一步纯化研究。首先,研究了姜酚的检测方法,并对超临界CO2提取姜油树脂中的组分进行分析检测。分析讨论了各种姜酚检测方法的优缺点,选定紫外分光光度法(UV)、高效液相色谱法(HPLC)和气相色谱-质谱联用法(GC-MS)三种方法结合对实验结果进行分析检测。在借鉴以往检测经验的基础上,采用梯度洗脱的方法提高HPLC的色谱分离度,并将其作为样品中姜酚含量的表征方法。分别采用HPLC和GC-MS对超临界C02提取的姜油树脂进行了检测分析。结果表明,姜油树脂中组分复杂,包含烯类、酮类、醛类、醇类、酚类等。其中含量最多的两种组分为姜酚和姜烯。在HPLC谱图中,姜酚的峰面积百分数为34.65%,姜烯的峰面积百分数为24.62%。而在GC-MS分析结果中,一部分姜酚受热转化为姜酮,在总离子流图中两者所占的峰面积百分数之和为38.06%。其次,利用大孔树脂柱层析法分离姜油树脂中的姜酚,并确定了分离条件。经过研究分析确定以非极性的大孔吸附树脂作为固定相,以乙醇-水体系作为流动相。使用UV对洗脱过程进行跟踪检测,建立洗脱曲线,并计算柱层析分离度和理论塔板数。结合HPLC分析结果,分别讨论了大孔树脂的型号、洗脱剂的配比、柱高、洗脱流速和温度对分离效果的影响。最终得出较优的分离条件为:D4020大孔树脂,洗脱剂配比Ⅴ(乙醇):Ⅴ(水)=7:3,柱高40cm,洗脱流速1mL/min,温度25℃。在经选定的分离条件下分离姜油树脂,对所得的姜酚段洗脱液样品进行HPLC和GC-MS检测。检测结果表明,原姜油树脂中的绝大多数杂质组分已被分离去除。HPLC谱图中姜酚的峰面积百分数提高到71.98%。而GC-MS总离子流图中姜酚和姜酮两者所占的峰面积百分数之和高达96.68%。结合姜酚样品和姜油树脂的HPLC检测结果,计算得姜酚收率为86.11%。最后,对初次柱层析分离所得姜酚样品,作了进一步纯化研究。在50℃下,采用减压蒸馏去除姜酚洗脱液样品中的溶剂,获得了黄色油状的粗姜酚。使用二次柱层析对粗姜酚样品做分离纯化。柱层析条件为:固定相D4020大孔树脂,洗脱剂70%乙醇,柱高40cm,洗脱流速1mL/min,温度25℃。经再次纯化后,样品中姜酚的峰面积百分数由71.98%提高到96.27%,纯化效果显著。
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