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目的:观察近β钛合金Ti-3Zr-2Sn-3Mo-25Nb(TLM)双层辉光离子渗氮改性层表面成骨细胞早期黏附、增殖、碱性磷酸酶活性、成骨相关基因的表达情况,研究TLM渗氮改性层对成骨细胞早期功能的影响。方法:近β钛合金TLM圆片试样经抛光、清洗后平均分成两组,实验组试样采用双层辉光离子渗氮处理,TLM抛光组作为对照。将小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14接种于两组试样表面,扫描电镜观察接种4h后细胞的黏附形貌;MTT法测3d、5d、7d细胞增殖情况;检测7d、14d细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real time,qRT-PCR)检测细胞Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor-2,RUNX2)、Ⅰ型胶原α1链(typeⅠcollagen alpha 1 chain,COLⅠα1)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-kappaB ligand,RANKL)mRNA的表达情况。结果:接种4h,TLM渗氮改性组细胞黏附形态良好,有细丝状伪足伸出,细胞间连接紧密;培养3d,实验组细胞量(0.277±0.007)明显高于对照组(0.249±0.004)(P=0.004)而培养5d和7d两组细胞量均未见明显差异;培养14d,实验组细胞ALP活性(173.606±1.884)明显高于对照组(162.582±2.426)(P=0.003);渗氮组RUNX2、Ⅰ型胶原α1链、骨保护素mRNA相对表达量均显著高于对照组(P<0.05),RANKLmRNA相对表达量显著低于对照组(P=0.016)。结论:近β钛合金TLM表面采用双层辉光离子渗氮改性后,改性层促进成骨细胞早期黏附,利于成骨细胞分化,提高细胞骨保护素OPGmRNA表达量,同时抑制了RANKLmRNA的表达。推测在改性层表面可能更快速形成骨结合。