拮抗酵母菌的生理调控机制研究

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以生物技术防控果蔬产品的采后微生物腐烂是当前果蔬病害防治的主要研究方向,论文以采后番茄灰霉病为对象,对已经发现有拮抗活性的BH-03酵母菌进行紫外诱变改良,并对得到的改良株进行活性鉴定与生长测定,在活体检测其效果的基础上,对拮抗菌的应用条件加以探索,以期为生产实践的应用奠定基础。紫外诱变结果表明,在原拮抗菌的孢悬液浓度为5.0×105个/mL时,紫外照射2min,光复活时间为3h,再次紫外照射时间为3min,菌株致死率为85.42%。通过平板对峙法、抑菌圈法和小室培养观察等多种方法的筛选,选出2株离体作用效果相对较好的突变株。两株诱变菌M菌和N菌在菌落形态上与原菌有部分差异,液体菌膜形态均与原菌有较大差异。M菌对数期较长,为7小时,N菌则分别在生长6小时后到达稳定期。番茄活体拮抗试验结果表明,接种诱变酵母M能使病斑直径减小13.96%,并且对致病菌产孢有良好抑制作用.采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,利用不同浓度胶体几丁质对实验室已经发现有拮抗作用的拮抗酵母菌M、N诱导培养,从果实抗性相关酶的角度,讨论利用外援物质诱导提高拮抗酵母生物活性的可行性及其机理。结果表明:在诱导提高酵母菌生防效力及其作用生理机制试验中,通过离体实验,确定M菌和N菌的胶体几丁质最优诱导培养浓度分别是1.0%和0.5%。从实验组和对照组抗性相关酶活性及同工酶图谱测定的结果中可以看出,经最优诱导浓度培养的拮抗菌发酵液处理后的果实,PPO同工酶活性变化显著;POD、SOD同工酶活性的变化,M菌较N菌影响显著。综上所述,利用紫外诱变技术,结合外缘物质的诱导,可以有效提高新型拮抗酵母的拮抗效果,为实际应用提供理论依据。
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