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油茶（Camellia oleifera Abel）是山茶科（Theaceae）山茶属（Camellia）植物，是我国特有的木本食用油料树种。油茶籽富含茶油和油茶皂苷（即茶皂素）。由于油茶皂苷种类繁多，且无标准样品，对其进行定性与定量比较困难。目前市场上流通的茶皂素纯度较低，限制了其应用范围，因此研究高纯度茶皂素的工业化纯化技术，将会提高油茶饼粕及精炼副产物的利用价值。本研究以油茶（Camellia Oleifera Abel）皂苷粗品为材料，研究油茶皂苷的HPLC检测方法，建立工业化纯化技术，分离纯化单体化合物并鉴定其化学结构，同时进行生物活性的探讨。主要结果如下：1、建立了油茶皂苷的HPLC-UV/ELSD分析测定方法。测定条件：流速1.0mL/min，进样量5μl，A相为0.2%乙酸，B相为100%乙腈，0～15min内流动相B由35%升至40%，45min时升到60%，55min时再升到80%，60min时回至35%；紫外检测波长为280nm，蒸发光散射检测器漂移管温度80℃，气体压力25psi，增益50，灵敏度0.01。紫外检测器与蒸发光检测器串联使用，其检测灵敏度互为补充，可全面地检测到油茶皂苷的主要组分。以oleiferasaponin A1为标准品，在280nm下HPLC-UV检测，结果显示：油茶皂苷在0.0096～6mg/mL范围内呈良好的线性相关，相关方程为y=553272x-2357.1，相关系数R2=0.9997。HPLC分析表明，油茶籽与饼粕中皂苷的种类相同，其化学性质稳定，在茶油加工过程中几乎没有变化，为油茶皂苷的综合开发提供便利。2、建立了油茶皂苷的HPLC/TOF-MS定性测定方法。分析表明油茶皂苷的分子质量主要集中在1039～1379D之间，与茶树（Camellia sinensis）中的皂苷分子质量范围基本一致。通过HPLC-MS/MS分析，推测了一个油茶皂苷化合物的m/z为1201（[M-H]-），分子式为C58H89O26，其结构式与日本山茶（Camellia japonica L）种子中含有的名为camelliasaponin B1的皂苷是相同的，这说明山茶属（Camellia）植物中含有的皂苷具有很高的相似性。通过HPLC-MS/MSn分析，推测油茶皂苷中存在较多分子量相差2和30的化合物，分子量相差2的化合物推测为4位C上的-CHO被-CH2OH取代；分子量相差30的化合物推测为4位C上的-CHO被-CH3取代，同时21位C上的-OH被H取代。3、开发了一种高纯度油茶皂苷工业化纯化技术。采用0.2μm陶瓷膜粗滤后与30000D透-5000D浓有机膜组合，对油茶皂苷进行初步分离，其后结合大孔树脂吸附技术进行纯化，喷雾干燥后得到高纯度油茶皂苷，得率为30.0%，纯度为94.2%。纯化后的油茶皂苷为白色粉末，粘性降低，其起泡性也得到明显改善。膜组件可以重复使用，大孔树脂价格低廉并可多次使用，连续上样8次，其吸附率和解析率基本不变，纯化过程仅使用乙醇溶剂并可回收，低碳环保，适合工业化开发。4、分离纯化出一个油茶皂苷新化合物。利用硅胶柱、C18柱及HPLC制备液相，分离纯化得到一个油茶皂苷化合物，经高分辨ESI-MS/MS分析，其m/z为1215.57975（[M H]），推测其分子式为C59H92O26，经IR、1H NMR和13C NMR及二维谱鉴定其为三萜皂苷的新化合物oleiferasaponin A1。5、初步研究了油茶皂苷的抑菌生物活性。研究表明100μg/mL油茶皂苷对植物性病原真菌和酵母菌具有较强的抑制活性，而10000μg/mL的油茶皂苷对试验处理组细菌几乎没有抑制活性，因此油茶皂苷可用于真菌抑制剂的开发；试验处理中，油茶皂苷对玉米小斑病菌抑制作用最明显，其MIC值为250μg/mL，油茶皂苷对茶炭疽病菌抑制作用最弱，其MIC值为2100μg/mL。电子显微镜观察250μg/mL的油茶皂苷处理的玉米小斑病菌菌丝，发现其顶端及中部细胞膨大呈泡囊状，阻碍了菌丝的生长，而油茶皂苷浓度达到2100μg/mL时，才对茶炭疽病菌具有较为明显的抑制作用，说明油茶皂苷对真菌的抑制作用具有一定的选择性；同时，油茶皂苷对H2O2损伤模型的PC12细胞具有保护特性，纯化后总皂苷和单体化合物oleiferasaponin A1的25、125μM剂量组与H2O2组差异均达极显著水平，为其在药物中的开发提供依据。