【摘 要】
：
研究背景:骨髓间充质干细胞（BMMSCs）异常增殖,成骨分化能力受损且成脂能力增强是骨质疏松主要的致病因素。而BMMSCs的分子调控失调是导致其异常分化和增殖的主要原因。寻找新的BMMSCs分化调控新分子及相关机制有助于理解成骨及成脂分化协调平衡,为骨质疏松预防和治疗提供新的思路。研究目的:本研究旨在揭示Ints7-Abcd3/Hdlbp相互作用对BMMSCs生物学行为的影响以及潜在的分子机制。研
论文部分内容阅读
研究背景:骨髓间充质干细胞（BMMSCs）异常增殖,成骨分化能力受损且成脂能力增强是骨质疏松主要的致病因素。而BMMSCs的分子调控失调是导致其异常分化和增殖的主要原因。寻找新的BMMSCs分化调控新分子及相关机制有助于理解成骨及成脂分化协调平衡,为骨质疏松预防和治疗提供新的思路。研究目的:本研究旨在揭示Ints7-Abcd3/Hdlbp相互作用对BMMSCs生物学行为的影响以及潜在的分子机制。研究方法:（1）免疫荧光检测Ints7定位。对Ints7进行干扰,用CCK-8法和EdU法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期分布,TUNEL法检测检测细胞凋亡,茜素红S染色检测BMMSCs成骨分化,油红O染色检测BMMSCs成脂分化及qRT-PCR检测成骨或成脂关键基因表达。（2）通过免疫共沉淀发现与Ints7结合的蛋白。对结合的蛋白分别进行干扰,用CCK8法和EdU法检测细胞增殖,TUNEL法检测检测细胞凋亡,茜素红S染色检测BMMSCs成骨分化,油红O染色检测BMMSCs成脂分化及qRT-PCR检测成骨或成脂关键基因表达。（3）Ints7和Abcd3干扰后,免疫荧光检测ROS变化及DNA损伤,qRT-PCR检测抗氧化剂mRNA水平,CCK-8法检测抗氧化剂挽救Ints7和Abcd3干扰后对BMMSCs细胞增殖的影响。研究结果:（1）免疫荧光发现Ints7主要定位在细胞质而不是细胞核。对BMMSCs细胞中Ints7进行干扰,发现细胞增殖降低、凋亡增加和细胞周期阻滞在G0/G1期;茜素红S和油红O染色发现成骨分化受到抑制而成脂分化增强。（2）通过免疫共沉淀以及质谱分析发现,Abcd3和Hdlbp可以和Ints7蛋白结合。随后,通过对Abcd3和Hdlbp分别进行干扰发现,Abcd3蛋白而不是Hdlbp蛋白参与BMMSCs的增殖与成骨分化。Abcd3干扰后,与Ints7干扰表型比较类似,即BMMSCs增殖减少、凋亡增加,成骨分化及其相关的标志基因Runx2,Alp,Osx和Ocn表达降低,而成脂及其相关的标志基因Ppaγ,C/ebpα和Adipsin表达增强。（3）我们进一步发现Ints7和Abcd3下调可以增加ROS数量,并因过量的ROS导致DNA损伤增加,同时抗氧化相关基因,如Sod1,Gpx1,Gpx4,Txnrd1和Cat表达降低。另外,抗氧化剂挽救Ints7和Abcd3干扰后对BMMSCs细胞增殖的影响。研究结论:Ints7-Abcd3相互作用通过抑制氧化应激刺激BMMSCs的增殖和成骨细胞分化。
其他文献
目的:微小RNA miR-23b-3p、促性腺激素释放激素受体（gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRHR）和双特异性磷酸酶 1（dual specificity phosphatase-1,DUSP1）均参与肿瘤细胞增殖、转移等多种生物学过程,但它们在三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancers,TNBC）中的表达模式
第一部分妊娠期糖尿病妊娠结局的调查研究目的:通过分析妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）孕妇年龄、孕产次、孕前体重指数（Body Mass Index,BMI）、分娩方式、新生儿体重、胎盘重量和新生儿体重/胎盘重量（fetal/placental weight,F/P）比率等因素,探讨与GDM发病的相关性因素,在孕期实现对GDM的合理干预,改善母婴妊娠
研究目的本论文通过建立高氧肺损伤动物模型和细胞模型,对组织和细胞中miR-20b表达进行了检测,意在阐述miR-20b与高氧肺损伤的关系;着重研究miR-20b对肺上皮细胞线粒体功能和细胞凋亡的作用;通过验证miR-20b与MFN1/MFN2的靶向关系,探讨miR-20b和MFN1/MFN2在高氧肺损伤发生机制中的作用。研究方法第一部分选取体重为200-220g的雄性SD大鼠,随机分为正常对照组和
[目 的]结直肠癌（Colorectal Cancer,CRC）是最常见的消化道恶性肿瘤之一。尽管联合化疗提高了晚期结直肠癌患者的治疗效果,但是化疗耐药及副反应是导致治疗失败、影响CRC患者生活质量的重要因素。肿瘤乏氧微环境在CRC的发生发展及治疗中扮演了重要的角色。脂质体具有靶向性、缓释性、安全性高等优点,作为抗肿瘤药物载体已经被广泛应用于临床。本研究旨在通过构建负载二甲双胍（Metformin
第一部分 CT影像组学在预测非小细胞肺癌PD-L1表达中的价值目的探讨肿瘤CT影像组学特征在预测非小细胞肺癌程序性死亡配体1（PD-L1）表达中的应用价值。方法回顾性分析2018年6月～2021年1月在江南大学附属医院行肺部CT扫描及PD-L1免疫组化检查的318例非小细胞肺癌患者的临床病理及影像资料。按2:1的比例随机分为训练集（212例）和验证集（106例）,以肺肿瘤穿刺或手术后病理结果为金标
研究背景和目的脓毒症患者合并急性肾损伤（acutekidney injury,AKI）预示着预后差,可用的干预措施有限。铁调素是应对铁负荷和炎症刺激时肝脏分泌的一种肽类激素。研究发现,脓毒症时,铁调素在肝脏合成增加,其在脓毒症感染的免疫防御和预后中可能发挥重要作用。但是,外源性铁调素在脓毒症AKI病理生理过程中的作用及机制尚不清楚。本研究旨在探讨外源性铁调素在脓毒症AKI中的作用,并通过体外、体内
第一部分椎间盘退变与年龄之间的相关性研究目的:研究椎间盘退变与年龄的关系,为椎间盘与年龄相关的退变研究提供理论基础。方法:本部分将不同月龄的雄性SD大鼠分为3个组,每组5只。3M组:3月龄大鼠;12M组:12月龄大鼠;24M组:24月龄大鼠。采用X线、MRI、组织病理、免疫组化、原子力学显微镜等方式对不同组别椎间盘退变情况进行分析。结果:结果显示与3M组相比,12M组X线下可见椎间隙清晰,未见明显
背景:长链非编码RNA（lncRNA）是非编码RNA家族成员,长度超过200个核苷酸,通常在肿瘤发生发展过程中作为原癌基因或肿瘤抑制因子,如癌细胞增殖、侵袭和凋亡。最近的研究表明lncRNALINC00665参与了肺癌的细胞周期调控。由于肿瘤发生网络复杂,LINC00665在肺腺癌（LUAD）进展中的潜在作用仍需要进一步研究。目的:在本研究中,我们探讨了 LINC00665在LUAD组织和细胞系中
第一部分 右美托咪定降低肾移植术后移植物功能延迟恢复:一项随机、双盲、对照的临床研究目的:移植物功能延迟恢复（DGF）是同种异体肾移植术后急性排斥反应和移植物失败的重要危险因素。本研究旨在探讨右美托咪定围术期泵注是否可以降低心脏死亡供体肾移植术后DGF的发生率,是否可以改善术后移植物功能。方法:在这个随机、双盲、安慰剂对照的临床研究中,选取2019年09月至2021年01月共114例诊断为终末期肾
本研究分三部分:1.超声特征多参数与组织病理学评估颈动脉粥样硬化斑块易损性;2.颈动脉粥样硬化斑块主要组织成分分布特征与斑块易损性的关系;3.颈动脉粥样硬化斑块新生血管分布特征与斑块易损性的关系。第一部分超声特征多参数与组织病理学评估颈动脉粥样硬化斑块易损性目的研究超声特征多参数与组织病理学在评估颈动脉粥样硬化斑块易损性中的作用,并分析它们在斑块不同部位的差异。方法1.研究对象:本研究连续纳入苏州