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目的：ω-3PUFAs对于维持生命有机体的正常发育和生长，防治各种疾病都有至关重要的作用，由于缺乏能够将ω-6PUFAs转化成ω-3PUFAs的脱氢酶基因，人体内的ω-6/ω-3PUFAs达不到1:1理想的平衡，所以每天必须摄入一定量的ω-3PUFAs，来保证有机体正常的功能和自身稳定。目前富含ω-3PUFAs食物主要是深海鱼类，来源范围很窄，导致人体内ω-6PUFAs过多而ω-3PUFAs严重不足，对婴幼儿智力发育、心脑血管疾病和癌症的预防起不了积极作用。因此从家畜繁殖与育种的角度出发，制备能够表达ω-3PUFAs的脱氢酶基因Fat-1的新品种绵羊，从而培育出富含ω-3PUFAs高品质羊肉。方法：1.Fat-1表达载体构建及转基因细胞系建立采用组织块附植法分离得到了18月龄萨福克公羊成纤维细胞系；通过PCR扩增得到了人泛素启动子UbB序列，对秀丽隐杆线虫Fat-1基因密码子根据绵羊对同义密码子使用偏好性进行优化，然后由公司合成获得oFat-1基因序列；双酶切法从pcDNA3.1中获得GBHpolyA序列，将上述3段序列共同插入pCMV-DsRed2-1载体的多克隆位点（MCS），得到重组真核表达载体pUbB-oFat-polyA-CMV-DsRed，载体序列再经酶切和测序，结果与预期一致。用单酶切法将表达载体线性化后，采用脂质体包裹后转染绵羊成纤维细胞，经G418抗性和红色荧光标记筛选得到阳性细胞，并进行PCR和反转录PCR鉴定，HPLC检测细胞中不饱和脂肪酸的变化。2.转基因绵羊的制备将得到的转Fat-1的绵羊成纤维细胞作为核移植供体细胞，移入去核后的绵羊成熟卵母细胞内制备克隆胚，经过融合、激活、发育得到的2细胞期重构胚，移入同步处理的31只受体羊子宫内，6-7枚/羊，妊娠并产下羔羊后PCR初步检测外源基因，分别取三只羊耳部皮肤体外培养，进行细胞染色体数目分析。结果：构建的真核表达载体序列正确，Fat-1基因能够在绵羊成纤维细胞基因组中正常表达，促进细胞ω-6PUFAs向ω-3PUFAs转化，ω-3PUFAs占总量的百分比从11.48%增加到24.41%,ω-6PUFAs的百分比从88.52%下降到75.59%，ω-6PUFAs/ω-3PUFAs比值从7.82±0.18下降到3.10±0.03，差异极显著（P＜0.01）。经过胚胎移植后有3只母羊妊娠，妊娠率9.67%，并顺利产下3只羔羊。经PCR初步检测有两只为转基因阳性，分别取三只羊耳部皮肤体外培养，进行细胞染色体数目分析，显示均具有正常的二倍体核型。结论：成功构建了UbB启动子介导的Fat-1真核表达载体,筛选得到表达不饱和脂肪酸脱氢酶的绵羊细胞，实现人泛素启动子UbB调控外源基因Fat-1在绵羊细胞内表达，并经过核移植技术克隆得到了2只转基因羊，为进一步制备转基因克隆绵羊奠定了基础。