多杀菌素和毒死蜱诱导的细胞DNA损伤和凋亡研究

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世界农药的变化主要源于环境保护对农药的要求。现代杀虫剂在高效控制害虫危害的同时其对生态环境和人类健康的安全性也越来越受到关注。多杀菌素和毒死蜱是农业生产上广泛应用的高效杀虫剂,尽管目前已有大量关于多杀菌素和毒死蜱杀虫作用和机制的研究报道,但多杀菌素的具体杀虫机制仍尚未明确,尤其是多杀菌素和毒死蜱的体外遗传毒性效应罕见报道。本论文选用了3株人细胞系Hela, HepG2、Hek293和3株昆虫细胞系Tn5B1-4、Sf9、S2,通过彗星电泳、γH2AX免疫荧光印迹、流式细胞术等技术手段研究和分析了多杀菌素和毒死蜱对细胞DNA损伤、线粒体膜电位、细胞凋亡等细胞生理的影响规律,初步阐明了多杀菌素和毒死蜱的细胞遗传毒性机制。研究表明,随着多杀菌素和毒死蜱作用浓度的升高或处理时间的延长,人和昆虫细胞活力均显著降低,多杀菌素对Hela、HepG2和Hek293细胞活力的抑制作用显著大于昆虫Tn5B1-4、Sf9和S2细胞,而毒死蜱对Tn5B1-4细胞活力的抑制作用显著大于HepG2细胞。多杀菌素和毒死蜱均能诱导细胞产生明显的彗星拖尾现象,且彗星尾长、尾面积和彗星细胞数都随药剂浓度的升高而增加,细胞中γH2AX焦点数和阳性细胞数也均随药剂浓度的升高而增多。多杀菌素能引起所有供试细胞线粒体膜电位的下降,且膜电位下降程度均随药剂浓度的增加而增大,而毒死蜱也强烈诱导HepG2细胞线粒体膜电位的下降,二者均能强烈地诱导细胞凋亡。结果表明,多杀菌素和毒死蜱可诱导人Hela、HepG2、Hek293细胞和昆虫Tn5B1-4、Sf9、S2细胞的DNA损伤,引起细胞凋亡,具有显著的遗传毒性。
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