背景在世界范围内,有数以万计的肝纤维化患者,随着病程的进展这些患者有可能发展为肝硬化,肝癌,甚至最终死于肝衰竭,虽然目前对肝纤维化的研究已取得了较大的进步,但是由于肝纤维化发生机制比较复杂,仍然没有较为有效的治疗方法。近年来,随着分子生物学及基因治疗技术的发展,越来越多的国内外学者认识到肝纤维化是由多种细胞因子作用的结果,这些细胞因子构成复杂的网络系统作用于肝细胞,导致肝细胞的损害。本课题前期研究表明美洲大蠊提取物具有抗实验性小鼠肝纤维化的作用,这种作用在大鼠模型中的作用机制如何,需要我们进一步研究。目的采用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,进一步观察美洲大蠊提取物(APA)对大鼠肝纤维化效果,初步探讨美洲大蠊提取物抗肝纤维化的作用机制。方法70只雄性SD大鼠随机分为7组,即空白对照组、模型组、APA高剂量组、APA中剂量组、APA低剂量组、三七丹参和秋水仙碱阳性药物对照组。除空白对照组外,其余各组分别于大鼠颈背部注射20%四氯化碳橄榄油溶液,0.05ml/10g,2次／周,连续7w。于造模的同时,空白对照组和模型组每日给蒸馏水灌胃；APA各剂量组、三七丹参组和秋水仙碱组分别灌服相应的受试药物,连续7w。末次灌胃后处死大鼠,常规检测肝功能；留取肝脏组织,行苏木素-伊红染色(HE)Masson染色；免疫组化检测肝组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-p1)、组织金属蛋白酶抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, a-SMA)、核转录因子-κB(nuclear transcription factors-KB,NF-KB)放射免疫检测透明质酸(Hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(Laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(Procollagen-Ⅲ,P-CⅢ)、Ⅳ型胶原(Type Ⅳ collagen,CⅣ)。实验数据采用SPSS17.0统计软件进行分析。结果1.美洲大蠊提取物能改善肝纤维化大鼠的精神状态、活动量、对外界的反应、皮毛颜色等一般情况,其中美洲大蠊提取物高剂量组改善更明显；2.各治疗组大鼠肝脏标本肉眼观察,颜色、表面光滑度、边缘、质地、肿大等情况均优于模型组,其中美洲大蠊提取物高剂量组,优于其它各治疗组；3.美洲大蠊提取物能降低肝纤维化大鼠血清丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)等肝功能指标,也可降低肝纤维化大鼠血清HA、LN、P-CⅢ、CⅣ四项肝纤指标,尤以高剂量组降低明显。4.美洲大蠊提取物可改善肝纤维化病理损伤,降低G、S病理评分,但各治疗组之间的差异无统计学意义。5.美洲大蠊提取物可降低肝纤维化大鼠肝脏组织中TGF-β1、TIMP-1、α-SMA、NF-κB的表达,其中美洲大蠊提取物高剂量降低明显。结论1.各治疗药物对肝纤维化大鼠的精神状态、活动量、对外界的反应、皮毛颜色等一般情况均具有改善作用,其中,高剂量美洲大蠊提取物改善更明显；2.美洲大蠊提取物对肝纤维化大鼠的肝脏损伤、肝功能损害具有保护作用；其中高剂量美洲大蠊提取物保护作用更为明显；3.美洲大蠊提取物可降低肝纤维化大鼠血清HA、LN、P-CⅢ、CⅣ四项肝纤指标,尤以美洲大蠊提取物高剂量的作用更为明显。并改善肝纤维化病理损伤,降低G、S病理评分,表明美洲大蠊提取物具有治疗大鼠肝纤维的作用。4.美洲大蠊提取物抗实验性肝纤维化的作用机制可能与其降低TGF-β1表达水平,进而导致TIMP-1基因表达减弱,导致ECM合成减少,延缓肝纤维化的进展。5.美洲大蠊提取物抗肝纤维化的作用机制可能通过抑制IκB激酶的激活,从而抑制NF-κB激活及向细胞核移位,阻止肝星状细胞的活化,抑制TNF-a、IL-6、细胞间粘附分子(ICAM)-1、转化生长因子(TGF)-β1等NF-κB下游致炎因子的表达,进而抑制各细胞因子间的级联放大效应,最终阻止肝纤维化的进展。