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研究背景：由于尸体供肾来源的限制，使活体供肾肾移植再次成为人们关注的焦点。活体供肾肾脏移植比尸体供肾肾脏移植有更高的要求。首先必须在保证供体安全的前提下为终末期肾病病人提供高质量的肾脏；其次，长期或终身的非特异性免疫抑制药物使用对肾移植受者产生的危害，要求我们应该将从动物实验中获得的知识和成功经验应用到临床。基于以上的基础，我们设计了对活体供肾肾移植的相关基础和技术的应用研究，目的是①观察和探讨移植肾切取前应用CT三维立体成像检测供肾解剖和血管状况的可行性和手辅助腹腔镜活体供肾切取手术(Hand-assistedLaparoscopicLivingDonorNephrectomy，HLDN)的优缺点；②移植受体接受非清髓性(Non-myeloablative)全身淋巴结照射(TotalLymphoidirradiation，TLI)预处理联合供体外周血造血干细胞(PeripheralBloodStemCells，PBSCs)输注对移植受体机体免疫状态的影响。
研究对象及方法：2001年12月-2003年1月，解放军309医院器官移植中心完成了8例活体供肾肾脏移植手术。供体年龄29-52岁，平均41岁；其中男性2例，女性6例；受体年龄平均30岁，男性5例，女性3例。供受体的关系：母子3对，父女1对，夫妻1对，姐妹1对，兄弟1对，姐弟1对；4个HLA-A、B、DR抗原错配1例，3抗原错配2例，2抗原错配1例，1抗原错配4例；淋巴细胞毒试验1-5％(≤10％为阴性)。供体供肾切取手术前常规肝、肾、心、肺功能和HBV、HCV、HIV及CMV检测；供肾肾功能检测主要检测血清肌酐和内生肌酐清除率。供肾的解剖和血管状态的评估应用CT三维立体成像。供肾切取手术均为手辅助腹腔镜活体供肾切取手术。8例供肾中的5例供受体进入非清髓性TLI预处理联合PBSCs输注的临床观察研究。这5位供体平均年龄40岁，其中男性2例，女性3例；受体平均27岁，男性3例，女性2例。供受体的关系：夫妻1对，姐妹1对，兄弟1对，母子1对，父女1对；4个HLA抗原错配1例，3抗原错配2例，1抗原错配2例。TLI治疗从移植手术前5天开始，90cGy/d，共5天。术中和术后的免疫抑制药物方案与同时期的活体或尸体肾移植相同，但剂量略减少。供体的PBSCs动员使用重组人粒细胞集落刺激因子(recombinanthumangranulocytecolonystimulatingfactor，rHuG-CSF)瑞雪新150μg/d共5天，PBSCs采集和输注共2次，分别在移植手术后的第4、7天。术后定期检测移植受体的外周静脉血WBC绝对值；用流式细胞仪检测T细胞和CD4+T细胞、CD8+T细胞和Th1、Th2亚群的变化；PCR-SSP方法检测外周血嵌合体(Chimerism)阳性率和持续时间；观察免疫抑制药物的使用情况，移植肾状态和急性排斥反应频率及GVHD等其他情况。
结果：8例供体均获得了良好的CT三维成像3D-CT(3-dimensionalvolumerenderingcomputedtomography)，并成功地指导了经腹腔手辅助腹腔镜活体供肾摘取手术；3D-CT检测的供肾血管状况、供肾的形态以及周围毗邻组织的立体关系与手术中的观察和供肾摘取后的体外对照完全一致。手辅助腹腔镜活体供肾切取手术的平均手术时间125min，供肾平均热缺血时间为2.88min，平均供肾动脉长度为1.89cm，平均供肾静脉长度是2.84cm。未发生任何手术并发症。术后7天供者恢复出院，6例受者术后第3-12天血肌酐恢复正常，2例受者发生肾功能延迟恢复(DelayedGraftfunction，DGF)。接受5天的G-CSF的动员后，除了1例供体出现不需医疗处理的肌痛外，没有其他副作用。5位供体采集PBSCs的平均数为34×106。接受TLI预处理的5位受体外周血WBC的最低值在术后的1-2周，在12周的观察期内均没有恢复到移植术前水平。T细胞总数和CD4+T细胞、CD8+T细胞最低值在术后的1-2周内，300天的观察期内没有恢复移植前水平；Th1细胞百分比在TLI治疗后减少，Th2细胞略有增加，因此Th2细胞相对增多。移植术后1个月5例受体外周血中均可检测到供体的HLA-DR抗原成份。2个月后4个HLA抗原错配(其中HLA-DR均错配)受体的外周血中嵌合体PCR检测阴性，3个月后1例HLA-DR均错配和1个HLA-B错配的受体外周血嵌合体检测阴性，其余3例受体外周血中的供体DNA仍为阳性。PBSCs输注后没有发生GVHD，没有任何感染发生。观察期内没有发生移植肾排斥反应，移植肾功能正常。免疫抑制剂使用量低于同时期的其他活体肾脏移植和尸体肾脏移植受体。
结论：(1)CT三维立体重建技术可以全方位、动态观察供肾形态以及与周围的关系，是一个可靠的术前评估供肾血管状况和形态特征的检查方法，并且3D-CT检查的方便性、无创性和经济性是DSA方法所不具备的，应作为活体供肾切取手术前的一项常规检查。(2)HLDN结合了单纯腹腔镜供肾摘取术(pureLaparoscopicLivingDonorNephrectomy,LDN)和开放供肾摘取术(OpenDonorNephrectomy,ODN)的优点，除了切口小，痛苦小和恢复快的微创手术的特点外，由于有了术者左手的辅助减少了单纯腹腔镜器械操作的难度，使外科医师更易掌握，显著缩短了手术时间和供肾热缺血时间，保证了供肾的质量；并且进入手术野的左手可以迅速及时处理一些紧急情况，减少并发症的发生，提高了供者的安全性和手术的成功率。(3)非清髓性的TLI治疗是一个安全有效的免疫抑制治疗手段，没有严重的副作用(如GVHD)和毒性，却可以获得较长时间的免疫抑制状态，促进供体PBSCs植入受体造血系统，诱导产生造血嵌合体，而造血嵌合体的形成可以减少肾脏移植的排斥反应，减少免疫抑制剂的应用。PBSCs的采集和输注简单、方便、有效，痛苦少，费用低，可以在门诊施行，是一个理想的造血干细胞移植或输注源。