尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)具有生长快、抗病力强、适应环境广等特点,而成为全球养殖量极大的一种经济鱼类。据联合国粮食及农业组织2015年公布的数据显示,2013年全球尼罗罗非鱼的年养殖量高达343.65万吨。尼罗罗非鱼养殖业的快速发展意味着需要更多淡水资源,而有限的淡水资源必将成为限制其快速发展的一个主要因素。尼罗罗非鱼具有广盐性特点,同时,我国有丰富的海水和半咸水资源,因此在海水或半咸水中养殖尼罗罗非鱼对于其产业的可持续发展具有重要意义。但是由于鱼类在海水和半咸水环境中需要大量的能量用于渗透压调节,因此盐度应激一定程度上会抑制尼罗罗非鱼的生长,同时也会引起一系列的生理变化。脂肪作为重要的能量营养素之一,不仅可以为鱼类的生命活动提供能量,也可以提供其所需的脂肪酸,同时还能促进其对脂溶性维生素的吸收,这有利于尼罗罗非鱼缓解盐度应激,但有关这方面的研究还比较缺乏。因此本文从脂肪营养角度探讨脂肪对尼罗罗非鱼盐度应激的缓解作用,以期为尼罗罗非鱼半咸水养殖及相关的饲料配方提供理论参考。1.不同盐度下尼罗罗非鱼幼鱼的生长、体成分、肌肉脂肪酸组成和抗氧化性能本实验以淡水组为对照,设置8、16和24psu三个盐度梯度。将分别在8、16和24psu盐度下驯化好的纯品系尼罗罗非鱼幼鱼(0.88±0.04g)分配到对应的盐度处理中,每个处理三个平行,每个平行25尾鱼,养殖周期为8周。结果发现：淡水组尼罗罗非鱼的增重率显著高于16和24psu组(P＜0.05),淡水组的饲料系数也低于16和24psu组(P＜0.05)；淡水组和8psu组的粗脂肪含量显著高于16psu和24psu组(P＜0.05),粗蛋白、灰分和水分不受盐度变化的影响(P＞0.05)。当盐度升高至16psu时,肌肉中多不饱和脂肪酸(亚麻酸、花生四烯酸和二十二碳六烯酸)含量增多(P＜0.05),但当盐度由16psu升高至24psu时,肌肉中亚麻酸含量减少(P＜0.05)；随着盐度的升高,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性都升高(P＜0.05),淡水组SOD和GPX活性与8psu组无差异(P＞0.05)；随着盐度的升高,丙二醛(MDA)的含量也升高(P＜0.05),但淡水组与8psu组也无差异(P＞0.05)；过氧化氢酶(CAT)的活性不受盐度变化的影响(P＞0.05)。结果提示：一定的盐度水平(16psu)会对纯品系尼罗罗非鱼的生长产生抑制作用,同时会激活其自身的抗氧化酶系统,且在一定程度上增加了鱼体肌肉中多不饱和脂肪酸比例和降低粗脂肪含量,但8psu的盐度水平不会对纯品系尼罗罗非鱼产生明显的影响。2.盐度和脂肪水平对尼罗罗非鱼幼鱼生长、抗氧化性能及非特异性免疫指标的影响以玉米油为油源配制了脂肪水平为6(对照)、9和12%的三种纯化饲料,研究了饲料中脂肪水平对淡水(对照)和16psu条件下吉富品系尼罗罗非鱼生长、抗氧化及非特异性免疫力的影响。将在淡水和16psu盐度下驯化好的吉富品系尼罗罗非鱼(1.09±0.03g)随机分配到对应的盐度处理中,饲喂不同脂肪水平的饲料,养殖周期为8周。结果发现：吉富品系尼罗罗非鱼的生长不受盐度和脂肪水平变化的影响(P＞0.05)。抗氧化酶活性也不受盐度变化的影响(P＞0.05),但在淡水组中,脂肪水平的升高会降低SOD活性(P＜0.05),而在半咸水中,随着脂肪水平的升高,SOD活性呈先升高后降低的趋势(P＜0.05)。脂肪水平的升高会明显抑制CAT活性(P＜0.05),而GPX活性则不受脂肪水平的影响(P＞0.05)。MDA含量不受盐度的影响(P＞0.05),但随着脂肪水平的升高,其含量会逐渐升高(P<0.05),但6%与9%组差异不显著(P＞0.05)。血清溶菌酶含量不受脂肪水平的影响(p＞0.05),但16psu组血清溶菌酶含量低于淡水组(P< 0.05).16psu组的血清蛋白含量则明显高于淡水组(P＜0.05)。随着脂肪水平的升高,血清蛋白含量明显增加(P＜0.05),但9%与12%组差异不明显(P＞0.05)。结果提示：吉富品系尼罗罗非鱼的生长性能不受盐度(≤16 psu)和脂肪水平(6-12%)的影响,这可能跟吉富品系尼罗罗非鱼具有较高的盐度耐受性有关。但过高的脂肪水平(12%)会导致鱼类脂质过氧化的发生,而适当的脂肪水平(9%)不仅会增强盐度应激下的鱼体抗氧化性能,还会促进血清中蛋白含量的增加,这可能有助于吉富品系尼罗罗非鱼适应半咸水环境。3.盐度和脂肪源对尼罗罗非鱼幼鱼生长、抗氧化性能及非特异性免疫的影响分别以玉米油、亚麻籽油、鱼油及三者等量配比的混合油配制成的含有不同油源的四种纯化饲料,研究了饲料中不同脂肪源对淡水(对照)和16psu条件下吉富品系尼罗罗非鱼生长、抗氧化及非特异性免疫力的影响。将在淡水和16psu盐度下驯化好的吉富品系尼罗罗非鱼(0.96±0.04g)分配到对应的盐度处理中,养殖周期为8周。结果发现：吉富品系尼罗罗非鱼的生长不受盐度和脂肪源的影响(P＞0.05)；玉米油组的幼鱼肝体指数明显高于亚麻籽油和鱼油组(P＜0.05),但与混合油组无差异(P>0.05)。16psu组的抗氧化酶活性低于淡水组(P<0.05);16psu组的MDA含量高于淡水组(P＜0.05),在16psu条件下,鱼油组的SOD和CAT活性都要低于其他各油源组(P＜0.05)；在淡水条件下,亚麻籽油组的CAT活性最高(P＜0.05),玉米油组的GPX活性最低(P＜0.05),并且其它各油源组间的差异不明显(P＜0.05)；鱼油组的MDA含量最高(P＜0.05),玉米油组的最低(P<0.05): 16psu组的血清溶菌酶含量和蛋白含量都要高于淡水组(P＜0.05),但都不受脂肪源的影响(P＞0.05)。结果提示：吉富品系尼罗罗非鱼的生长不受本研究中脂肪源和盐度(≤16 psu)的影响,但吉富品系尼罗罗非鱼的抗氧化性能受盐度的抑制；在16psu盐度下,饲料中添加鱼油不仅没有促进吉富品系尼罗罗非鱼的生长,反而会导致鱼体内脂质过氧化的发生,而添加植物油的饲料组既可以达到与添加鱼油饲料组相同的生长效果,同时脂质过氧化程度也要低于添加鱼油的饲料组。因此,在吉富品系尼罗罗非鱼的半咸水养殖中,同样可以用植物油替代鱼油。4.尼罗罗非鱼脂肪酸延长酶基因片段的克隆及其表达与盐度和脂肪营养关系的研究本实验以吉富品系尼罗罗非鱼肝胰脏为样品克隆了其elovl5基因的部分片段,所获片段大小为383bp,包括57bp 5’非编码区,以及部分的开放阅读框(326bp),共编码109个氨基酸。通过氨基酸序列比对发现,该序列编码的氨基酸与其它鱼类的elovl5基因的同源性为69%-85%。在此基础上,采用荧光定量PCR技术,进一步研究了吉富品系尼罗罗非鱼肝胰脏elovl5基因表达与水体盐度及饲料脂肪源的关系。结果发现,在淡水条件下,植物油组elovl5基因的相对表达量显著高于鱼油和混合油组(P＜0.05),但16psu条件下的亚麻籽油组elovl5基因相对表达量显著低于其在淡水条件下的(p<0.05)；16psu条件下的鱼油组elovl5基因相对表达量则明显高于其在淡水条件下的(P＜0.05)。这些实验结果表明,不论是在淡水还是半咸水条件下,吉富品系尼罗罗非鱼都更偏向于利用玉米油。在半咸水条件下,鱼油虽然可以通过为吉富品系尼罗罗非鱼提供大量的高不饱和脂肪酸来协助罗非鱼适应盐度的变化,但其不能为罗非鱼提供ARA,因此elovl5基因表达水平上升。这些结果提示在吉富品系尼罗罗非鱼的半咸水养殖中,也可以用玉米油替代鱼油,但不是亚麻籽油。