转Bt基因棉影响土壤微生物群落结构与功能的研究

来源 :南京大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wreck2
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
自20世纪70年代DNA重组技术创建以来,转基因植物的研究和开发取得了一系列令人瞩目的成就。其中转Bt基因棉花因为可以表达Bt毒蛋白而具有良好的抗虫性,已在我国大范围推广种植。随着研究的深入,近年来转Bt基因植物的潜在风险和影响日益受到重视,并已基本清楚了Bt蛋白毒性、转基因逃逸的风险、超级杂草等问题,但转基因植物对于土壤微生物群落结构与功能的影响尚缺乏系统的研究。土壤蕴含丰富的微生物群落,它们在生态系统中起着举足轻重的作用,是土壤生态系统的重要组成部分。微生物活性和多样性是土壤微生态系统受胁迫程度的重要指标。转基因植物及其产物进入土壤以后,可能会与土壤微生物发生相互作用,影响到微生物的活动过程。基于微生物对生物地球化学循环有着重要的贡献,因此研究转基因植物对微生物的影响具有重大的生态保护意义,而转基因作物对土壤生态系统的影响则是转基因植物风险评价的重要组成部分。   本研究选用以CK1为受体的转Bt基因棉品系Bt1-1、Bt1-2(第一组)和以CK2为受体的转Bt基因棉品系Bt2-1、Bt2-2(第二组)为材料,研究了在温室盆栽种植条件下,转Bt基因棉对土壤微生物功能、群落结构及遗传结构的影响。分析了土壤中主要营养元素的变化;相关的土壤酶活性差异;提取土壤微生物磷脂脂肪酸(PLFA)标记,利用气质联用(GC-MS)技术分析了转Bt抗虫棉对土壤微生物群落结构的影响;基于16SrDNA的基因的V3保守区,应用PCR-DGGE分子生物学技术探讨了转Bt抗虫棉对细菌群落的遗传多样性的影响。   研究结果表明,与非Bt棉相比,转Bt基因棉根际土壤部分理化性质、微生物生物量有显著差异,且与基因型有关:转Bt基因棉根际土壤Cu元素含量显著升高,而K、Fe、Mg元素含量变化在两组转基因棉品系表现不一致,Ca、Mn、Co和Zn等其它金属元素含量没有显著差异;微生物生物量方面,转Bt基因棉与非Bt棉相比,总氮差异不显著,总磷显著降低,而总碳含量存在基因型差异,微生物生物量碳(Cmic)既存在基因型差异,又与植物本身的性质有关。   种植转Bt棉后土壤酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、蔗糖酶、乙酰荧光素(FDA)水解酶活性均有不同程度的变化。在以CK1为受体的转Bt基因棉品系中,转Bt基因棉花较其受体棉根际土壤的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、蔗糖转化酶和FDA水解酶活性显著增加。在以CK2为受体的转Bt基因棉品系中,酸性磷酸酶和FDA水解酶活性在三种样品中没有显著差异,而Bt2-2的碱性磷酸酶活性显著低于对照CK2,Bt2-1的蔗糖转化酶活性显著增高。   通过对磷脂脂肪酸甲酯的GC-MS分析,在两组实验中共检测到20种特异性的PLFA,其中14:0,i15:0,a15:0,16:0,i18:0,18:0,cy19:0这几种脂肪酸在两组转基因株系中显著性差异不一致。在以CK1为受体的转Bt基因棉品系中,Bt1-1、Bt1-2中总的PLFA、细菌PLFA、真菌PLFA、革兰氏阳性菌PLFA、革兰氏阴性菌PLFA含量以及G+/G-显著高于对照CK1,而放线菌PLFA和真菌与细菌PLFA之比在所有处理中没有显著差异。在以CK2为受体的转Bt基因棉品系中,检测到19种特异性的PLFA,3种不同处理土壤之间总的PLFA、细菌PLFA、真菌PLFA、革兰氏阳性菌PLFA、革兰氏阴性菌PLFA含量以及放线菌PLFA含量有一个一致的趋势:Bt2-2显著高于对照CK2,但Bt2-1和CK2之间没有显著差异。G+/G-以及真菌与细菌PLFA含量之比在三者之间无显著性差异。   基于16S rDNA的PCR-DGGE指纹图谱结果显示在以CK1为受体的转Bt基因棉品系中,转Bt棉花Bt1-1、Bt1-2与受体CK1之间的根际土壤微生物在16S rDNA条带数量和位置上有显著差异。在以CK2为受体的转Bt基因棉品系中,Bt2-1、Bt2-2与相应的受体CK2之间的根际土壤微生物在16S rDNA条带数量和位置上也有显著差异,实验结果与第一组实验类似。根据DGGE图谱中条带的位置和有无目标条带进行的主成分分析及系统发育分析同样显示,转基因棉花较非转基因受体根际土壤微生物遗传结构发生了显著变化。   综合实验分析结果表明,转Bt棉的种植会引起部分土壤元素含量、土壤微生物功能、群落结构与遗传结构的显著变化,而这些指标之间是否具有一定的相互作用值得进一步深入探讨。
其他文献
唐云(一九一○-一九九三)是继吴昌硕、黄宾虹之后,与陆俨少并驾齐驱的海派大家,也是著名的收藏家、鉴赏家。学名侠尘,号药翁、老药、大石、大石翁。浙江杭州人。自幼酷爱书画
目的:观察前列腺素E1脂微球载体制剂治疗肺心病心力衰竭的疗效。 方法:将葫芦岛市中心医院呼吸内科2005年1月~2005年3月间收治的明确诊断为肺心病心力衰竭的60名患者随机分为
第一部分难溶性药物姜黄素作为纳米晶稳定剂制备Pickering乳剂的研究  目的:使用姜黄素纳米晶(curcumin nanocrystalline ;CCM-NC)作为固体颗粒稳定剂;制备姜黄素纳米晶自稳定
目的:高血压、心绞痛、心律不齐等疾病已严重威胁了人类的生命健康,且发病率和死亡率呈逐年上升趋势。琥珀酸美托洛尔是一种选择性的β1受体阻滞剂,其对心脏β1受体产生作用所需浓度低于其对外周血管和支气管上的β2受体产生作用所需浓度。由于缓释片的血药浓度低于普通片,因此具有更高的β1受体选择性。目前国内上市缓释制剂为倍他乐克,但还未见仿制报道。本研究旨在制备一种琥珀酸美托洛尔多单元缓释制剂,可分开服用,每
怀牛膝为苋科牛膝属多年生草本植物牛膝(Achyranthes bidentata Bl.)的干燥根,其味甘苦酸,性平,入肝、肾经.具有补肝肾、强筋骨、逐瘀通经、引血下行之功效.现代药理研究表明
本文采取溶剂萃取法和现代色谱分离技术,如碱提酸沉、硅胶柱层析、薄层层析等对唐古特大黄游离蒽醌类成分进行研究,从中提取分离纯化得到五个游离蒽醌化合物,利用HPLC和现代光谱
5月18日,澳大利亚联邦选举投票将确定是由自由党-国家党联盟继续掌权,还是由工党赢得政权.但无论谁获胜,新的政府领导者都需要应付国家宽带网络(NBN),一个由澳大利亚政府建设
期刊
该文通过加液法绘制了微乳及自微乳的伪三元相图,并根据相图中微乳区确定了四组分自微乳基本处方组分,发现并确定了三组分稳定自微乳系统,较全面地考察了影响两种系统稳定性
谷氨酸(glutamate)是中枢神经系统主要兴奋性递质,对神经系统的发育及正常功能的维持起着重要的作用.脑组织中的谷氨酸大部分位于神经细胞内,细胞外极少,其胞内外跨膜浓度梯
目的:通过观察血糖安对2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4和胰岛B细胞K通道Kir6.2亚单位mRNA表达影响,探讨血糖安对2型糖尿病大鼠的降血糖作用机制.方法:用高脂饲料灌胃正常大鼠1 0d,