Simplicillium lanosoniveum胞外多糖合成条件的优化及其动力学分析

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Simplicillium lanosoniveum var tianjinienss Q.L.Dong(DT06)是一株能够合成抗氧化性胞外多糖的半知纲类真菌,其分泌的胞外多糖在食品、医药方面均有潜在的应用价值。本实验以真菌DT06为研究材料,在单因素实验的基础上,根据BBD设计原则的表面响应法优化真菌DT06胞外多糖的合成条件,并对其进行动力学和计量学分析。首先,筛选出产胞外多糖最适的培养基,结果显示:沙氏培养基产多糖得率最高,为最适产糖培养基。然后将最适培养基成份(葡萄糖、蛋白胨)和培养条件(pH、温度、转速)分别设置5个等梯度,结果得到三个显著影响因素:葡萄糖、蛋白胨和pH。在单因素实验的基础上,以葡萄糖、蛋白胨、pH为优化三因素,胞外多糖得率为响应值,确定了多糖合成的最优条件:初始pH 4.87,葡萄糖40.65 g/L,蛋白胨10.38 g/L,预测多糖得率为0.141 g/g。经实验验证,优化后真菌DT06胞外多糖平均得率可达0.139 g/g,比优化前提高了32%,平均相对误差为1.4%在允许误差范围内,表明该模型模拟程度较好,实验方案合理。在此优化条件下,对真菌DT06的发酵过程进行动力学分析,结果表明:DT06最大比生长速率μmax=0.156 h-1,饱和常数KS=5.16 g/L。该多糖属于生长部分偶联型产物,最大比合成速率可达0.066 h-1,其合成动力学方程关联参数α=0.539,β=0.002。经实验验证表明:建立的动力学方程模拟值与实验值大致吻合,能够较好的反映出真菌DT06各参数之间的关系。与其它产多糖的真菌相比DT06合成多糖的最大比合成速率较高可达到0.066 h-1,但总的多糖得率却较低。经碳平衡计算发现DT06还产生一种未知的中性含碳产物,其碳得率为0.129 g/g。上述实验结果为DT06多糖发酵过程的调控及其胞内代谢网络的构建与优化提供了依据。
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