传统中医药是世界医学的一个重要组成部分，随着现代中药学的发展和新药开发的要求，人类迫切需要了解中药的有效成分。中国加入WTO后，中医药现代化显示出更加广阔的发展前景，对传统药、民族药、中草药、植物药等天然药物的分离技术也提出了更高的要求。因而开展中药有效成分分离新方法研究对于促进现代中药学和中药现代化的发展具有重要意义。 高速逆流色谱(High-Speed Counter-Current Chromatography，简称HSCCC)是20世纪80年代初，由Yoichiro Ito博士在液一液分配色谱的基础上研究和发展起来的一种现代色谱分离制备技术<[1]>。它利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡，当其中一相作为固定相，另一相作为流动相，在连续洗脱的过程中能保留大量的固定相，物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现。由于不需要固体支撑体，因而避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性等，不仅使样品能够全部回收，回收的样品也能反映其本来的特性，特别适合于天然生物活性成分的分离。目前，HSCCC技术已发展成为一种备受关注的新型分离纯化技术，广泛应用于生物医药、天然产物、食品、化妆品等领域。 本文对HSCCC在中草药有效成分的制备性分离纯化方面的应用进行了研究，建立了分离纯化中药蔓荆子、升麻、丹参和鱼腥草中的有效成分的新方法，并利用紫外光谱(UV)、高效液相色谱(HPLC)、核磁共振波谱(NMR)等对目标产物的纯度和化学结构进行了分析和鉴定。本工作可以为蔓荆子等四种中药及其制剂的鉴别及质量控制、药理研究与开发提供参考。 一、HSCCC分离纯化蔓荆子主要化学成分的研究建立了HSCCC分离纯化蔓荆子中主要化学成分的新方法。溶剂体系为石油醚．乙酸乙酯．甲醇．水，固定相为(5：5：3：7，v/v)体系的上相，以(5：5：3：7，v/v)和(5：5：5：5，v/v)体系的下相为流动相进行梯度洗脱。从200 mg蔓荆子粗提物中一步分离纯化得到15 mg对羟基苯甲酸、7.8 mg 3，6，7-三甲基槲皮万寿菊素、16 mg紫花牡荆素和6 mg艾黄素。经HPLC分析，纯度分别为99.7％，97.9％，99.9％和94.8％。由Uv光谱、<1>H-NMR和<13>C-NMR数据确定了其化学结构。 二、HSCCC分离纯化升麻主要化学成分的研究采用大孔吸附树脂对升麻药材进行预处理，初步除去样品中的大量杂质之后，应用HSCCC从中药升麻中分离纯化得到四个化合物。溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(4：6：3：7，v/v)，下相为流动相。从100 mg升麻粗提物中一步分离纯化得到15.6 mg升麻素、12.8 mg咖啡酸、32.2 mg异阿魏酸和10.6 mg阿魏酸。经HPLC分析，纯度分别为99.1％，98.6％，99.9％和96.2％。由UV光谱、<1>H-NMR和<13>C-NMR数据来确定了其化学结构。 三、HSCCC分离纯化丹参醌类成分的研究应用HSCCC分离纯化丹参中的醌类化合物，所用溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(6：4：6．5：3.5，v/v)。从200 mg丹参粗提物中分离纯化得到14.21 mg二氢丹参酮Ⅰ，9.83mg 1，2，15，16-四氢丹参新醌，36.27 mg隐丹参酮，20.23 mg丹参酮Ⅰ，24.62 mg甘西鼠尾新酮，12.31 mg丹参新酮和38.78 mg丹参酮ⅡA。经HPLC分析，纯度分别为97.6％，95.2％，99.1％，99.1％，90.3％，99.4％和99.5％。由UV光谱和<1>H-NMR数据来确定了其化学结构。 四、HSCCC分离纯化鱼腥草黄酮类成分的研究建立了HSCCC分离纯化鱼腥草黄酮类成分的新方法。溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(3：7：1：9，v/v)。从200 mg鱼腥草粗提物中一步分离纯化得到5.5 mg未知物、16.6 mg槲皮苷和28.7 mg槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖苷，经HPLC分析其纯度分别为98.1％、99.5％和99.3％。由UV光谱、<1>H-NMR和<13>C-NMR数据来确定了其化学结构。