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研究背景:在全球范围内,肝细胞癌是发病率和死亡率居于前列的恶性肿瘤之一,而我国肝细胞癌发病率位于亚洲第一。现阶段用于肝细胞癌的主要治疗手段为手术切除,辅助以化疗和放疗,但治疗效果不佳。随着研究的进行,关于micro RNA应用于肿瘤治疗的观点越来越受到关注。其中mi R-124-3p是与多种肿瘤的增殖、迁移和侵袭密切相关的抑癌分子,但其在癌组织中低表达。在肝细胞癌中,mi R-124-3p能够通过抑制细胞周期蛋白cyclin D1的表达从而抑制细胞增殖。但关于调控其自身表达的研究报道甚少。肝X受体(liver X receptor,LXR)是一类参与糖脂代谢,并具有抗炎作用的转录因子。近年来,抗肿瘤作用被认为是其新的功能而越来越受到关注,但其机制尚未完全阐明。长链非编码RNA H19(long non-coding RNA H19,lncRNA H19)是一种与肿瘤密切相关的长链非编码RNA,现有研究发现,H19在肝癌组织和肝癌细胞中低表达,过表达H19能够抑制肝癌细胞的迁移和侵袭。那么同样具有抗HCC作用,LXR与mi R-124-3p以及H19与mi R-124-3p之间是存在联系,目前尚无报道。研究目的:探讨肝癌细胞中H19与mi R-124-3p和LXR与mi R-124-3p的相互关系,以及H19和LXR对肝癌细胞系增殖的影响。研究方法:(1)构建lncRNA H19过表达质粒pc DNA3.1-H19,在Hep G2和SMMC7721细胞中转染pc DNA3.1-H19质粒后,CCK-8检测细胞增殖情况;提取RNA,并逆转录成c DNA和micro RNA,通过real-time PCR检测mi R-124-3p和cyclin D1的表达;提取细胞总蛋白,通过Western Blot检测cyclin D1的蛋白表达。(2)过表达H19的同时用si NRA干扰mi R-124-3p后,用CCK-8法检测细胞增殖,real-time PCR和WB分别检测cyclin D1的m RNA和蛋白表达。(3)用LXR激动剂GW3965和TO901317处理Hep G2细胞后,通过CCK-8法检测LXR激动剂对肝癌细胞Hep G2增殖的影响;real-time PCR检测mi R-124-3p的表达,real-time PCR和Western Blot分别检测cyclin D1的m RNA和蛋白表达。(4)干扰mi R-124-3p并用LXR配体处理Hep G2细胞后,CCK-8检测细胞增殖情况;eal-time PCR和WB分别检测cyclin D1的m RNA和蛋白表达。(5)在裸鼠腋下种植Hep G2细胞,细胞接种量为1×107个/只,当肿瘤形成后,腹腔注射GW3965(30mg/kg/d),观察给药后肿瘤生长情况,7次给药完成后,检测瘤组织中mi R-124-3p和cyclin D1的表达。研究结果:1.在Hep G2和SMMC7721细胞中,过表达H19能够促进mi R-124-3p的表达,并且能够抑制cyclin D1的表达,抑制细胞增殖。2.在Hep G2细胞中,GW3965和TO901317两种激动剂能够促进mi R-124-3p的表达,并能够抑制cyclin D1的表达。3.LXR激动能够抑制Hep G2细胞增殖,且呈剂量依赖性。4.干扰mi R-124-3p后,LXR激动剂对cyclin D1表达和细胞增殖的抑制作用减弱。5.在荷瘤鼠模型中,GW3965能够抑制肿瘤的生长,促进肿瘤组织中mi R-124-3p的表达,抑制cyclin D1的表达。结论:1.lncRNA H19通过促进mi R-124-3p表达从而抑制cyclin D1表达,抑制肝癌细胞增殖。2.在Hep G2细胞中,LXR激动剂GW3965和TO901317通过促进mi R-124-3p的表达,降低cyclin D1的表达,抑制肝癌细胞增殖。