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目的：
本实验通过投喂高脂饲料复制非酒精性脂肪性肝病大鼠模型，并且使用祛痰活血方进行干预，检测相关指标，然后总结出祛痰活血方对NAFLD大鼠PPARα/CPT-1通路及胰岛素抵抗的影响，从脂代谢角度探讨其治疗NAFLD的作用。为名老中医的临床实践经验和学术理论传承提供依据。
方法：
1.分组、造模及给药
（1）将32只SPF雄性SD大鼠随机分为正常组（共计6只)、造模组（共计26只)，正常组大鼠选择投喂充足普通饲料，造模组大鼠投喂充足高脂饲料，正常组和造模组除投喂饲料不同以外，其余条件均相同各组大鼠均自由活动、进食及饮水。造模过程总持续8周。
（2）造模8周后，从造模组大鼠中随机抽取2只大鼠验证造模是否成功，禁食12 h，称重、麻醉，解剖、分离大鼠肝脏，生理盐水清洗多余血水，吸水纸擦干多余水分，取肝左叶组织行苏木素-伊红(HE)染色，得到肝脏病理结果，对比NAS积分确认NAFLD大鼠模型复制成功。将剩余NAFLD大鼠(24只)再次随机分组，分别为M组（模型组6只)、D组（祛痰活血方低剂量组6只)、Z组（祛痰活血方中剂量组6只)、H组（祛痰活血方高剂量组6只)。
（3）分组后饲料供应不变。C组和M组大鼠按照10 mL·kg-1·d-1的剂量予以医用级别无菌9% NaCl注射液灌胃；D、Z、H组则分别按照6，12，16 g·kg-1·d-1的剂量予以祛痰活血方药液灌胃。此过程总持续4周。
2.标本采集与处理
（1）干预第4周末，禁食12 h，称重，麻醉，打开大鼠腹腔，一次性采血针行腹主动脉穿刺，负压采血管采集动脉血约5 mL，静置4 h后离心，保留上层清亮血清，-80℃冰箱保存备用。
（2）牺牲大鼠，对大鼠进行解剖，摘取肝脏，称取质量。取肝左叶置中性福尔马林中固定，行HE染色；另取肝右叶约1.0cm×1.0cm×1.0cm大小行冰冻切片，行油红O染色；剩余肝脏放入冻存管中，保存于-80℃冰箱中。
3.比较祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏病理学改变的影响
采用HE和油红O染色观察祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏病理学的影响。
4.比较祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠相关血清生化指标的影响
（1）试剂盒检测大鼠血清 ALT、AST、TG、TC、LDL-C、HDL-C、FBG含量。
（2）ELISA法检测大鼠血清FINS含量。
（3）计算HOMA-IR。
5.比较祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠PPARα、CPT-1、IRS-1 mRNA表达的影响
采用Real-time PCR方法检测祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织PPARα、CPT-1、IRS-1 mRNA表达。
6.比较祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠PPARα、CPT-1、IRS-1蛋白表达的影响
采用Western blotting方法检测祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠PPARα、CPT-1、IRS-1蛋白的表达。
结果：
1.一般情况的比较：与C组相比，M组大鼠喜卧，活动量较少，体型肥胖，毛色黯淡，大便稀溏、臭秽。各干预组较M组一般情况均有不同程度改善，其中H组在外观、活动等方面与C组接近。
2.大鼠肝脏病理切片结果：与C组相比，M组大鼠肝组织损伤最为严重，肝小叶结构紊乱，可见大量肝细胞空泡及水样变性，可见大小不一的圆形脂滴；各干预组肝脏损伤程度较M组有所减轻，其中H组损伤程度更小，结果与C组接近。
3.血清生化指标的比较：与C组相比，M组大鼠肝损伤最严重，血脂最高，胰岛素抵抗指数最高；与M组相比，各干预组大鼠肝功能（ALT、AST）、血脂（TC、TG）、脂蛋白（LDL-C、HDL-C）及胰岛素指数抵抗均得到好转。其中H组效果最好（P＜0.05）。
4. PPARα、CPT-1、IRS-1 mRNA及蛋白表达：与C组相比，M组大鼠肝组织表达均明显下降，与M组相比，各干预组表达均升高，其中H组效果最好（P＜0.05）
结论：
1.高脂饲料喂养8周可成功复制NAFLD大鼠模型；
2.祛痰活血方能改善肝组织变性及脂质沉积；其中以高剂量组更佳；
3.祛痰活血方能改善血清学指标，其中以高剂量组更佳；
4.祛痰活血方能上调PPARα、CPT-1、IRS-1表达，其中以高剂量组更佳；
5.祛痰活血方能治疗非酒精性脂肪性肝病其作用机制可能与其机制可能与祛痰活血方激活PPARα/CPT-1通路，上调IRS-1的表达，进而改善肝脏脂质代谢和IR，减轻肝脏脂肪变性程度及炎症反应，从而治疗非酒精性脂肪性肝病。
本实验通过投喂高脂饲料复制非酒精性脂肪性肝病大鼠模型，并且使用祛痰活血方进行干预，检测相关指标，然后总结出祛痰活血方对NAFLD大鼠PPARα/CPT-1通路及胰岛素抵抗的影响，从脂代谢角度探讨其治疗NAFLD的作用。为名老中医的临床实践经验和学术理论传承提供依据。
方法：
1.分组、造模及给药
（1）将32只SPF雄性SD大鼠随机分为正常组（共计6只)、造模组（共计26只)，正常组大鼠选择投喂充足普通饲料，造模组大鼠投喂充足高脂饲料，正常组和造模组除投喂饲料不同以外，其余条件均相同各组大鼠均自由活动、进食及饮水。造模过程总持续8周。
（2）造模8周后，从造模组大鼠中随机抽取2只大鼠验证造模是否成功，禁食12 h，称重、麻醉，解剖、分离大鼠肝脏，生理盐水清洗多余血水，吸水纸擦干多余水分，取肝左叶组织行苏木素-伊红(HE)染色，得到肝脏病理结果，对比NAS积分确认NAFLD大鼠模型复制成功。将剩余NAFLD大鼠(24只)再次随机分组，分别为M组（模型组6只)、D组（祛痰活血方低剂量组6只)、Z组（祛痰活血方中剂量组6只)、H组（祛痰活血方高剂量组6只)。
（3）分组后饲料供应不变。C组和M组大鼠按照10 mL·kg-1·d-1的剂量予以医用级别无菌9% NaCl注射液灌胃；D、Z、H组则分别按照6，12，16 g·kg-1·d-1的剂量予以祛痰活血方药液灌胃。此过程总持续4周。
2.标本采集与处理
（1）干预第4周末，禁食12 h，称重，麻醉，打开大鼠腹腔，一次性采血针行腹主动脉穿刺，负压采血管采集动脉血约5 mL，静置4 h后离心，保留上层清亮血清，-80℃冰箱保存备用。
（2）牺牲大鼠，对大鼠进行解剖，摘取肝脏，称取质量。取肝左叶置中性福尔马林中固定，行HE染色；另取肝右叶约1.0cm×1.0cm×1.0cm大小行冰冻切片，行油红O染色；剩余肝脏放入冻存管中，保存于-80℃冰箱中。
3.比较祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏病理学改变的影响
采用HE和油红O染色观察祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏病理学的影响。
4.比较祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠相关血清生化指标的影响
（1）试剂盒检测大鼠血清 ALT、AST、TG、TC、LDL-C、HDL-C、FBG含量。
（2）ELISA法检测大鼠血清FINS含量。
（3）计算HOMA-IR。
5.比较祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠PPARα、CPT-1、IRS-1 mRNA表达的影响
采用Real-time PCR方法检测祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织PPARα、CPT-1、IRS-1 mRNA表达。
6.比较祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠PPARα、CPT-1、IRS-1蛋白表达的影响
采用Western blotting方法检测祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠PPARα、CPT-1、IRS-1蛋白的表达。
结果：
1.一般情况的比较：与C组相比，M组大鼠喜卧，活动量较少，体型肥胖，毛色黯淡，大便稀溏、臭秽。各干预组较M组一般情况均有不同程度改善，其中H组在外观、活动等方面与C组接近。
2.大鼠肝脏病理切片结果：与C组相比，M组大鼠肝组织损伤最为严重，肝小叶结构紊乱，可见大量肝细胞空泡及水样变性，可见大小不一的圆形脂滴；各干预组肝脏损伤程度较M组有所减轻，其中H组损伤程度更小，结果与C组接近。
3.血清生化指标的比较：与C组相比，M组大鼠肝损伤最严重，血脂最高，胰岛素抵抗指数最高；与M组相比，各干预组大鼠肝功能（ALT、AST）、血脂（TC、TG）、脂蛋白（LDL-C、HDL-C）及胰岛素指数抵抗均得到好转。其中H组效果最好（P＜0.05）。
4. PPARα、CPT-1、IRS-1 mRNA及蛋白表达：与C组相比，M组大鼠肝组织表达均明显下降，与M组相比，各干预组表达均升高，其中H组效果最好（P＜0.05）
结论：
1.高脂饲料喂养8周可成功复制NAFLD大鼠模型；
2.祛痰活血方能改善肝组织变性及脂质沉积；其中以高剂量组更佳；
3.祛痰活血方能改善血清学指标，其中以高剂量组更佳；
4.祛痰活血方能上调PPARα、CPT-1、IRS-1表达，其中以高剂量组更佳；
5.祛痰活血方能治疗非酒精性脂肪性肝病其作用机制可能与其机制可能与祛痰活血方激活PPARα/CPT-1通路，上调IRS-1的表达，进而改善肝脏脂质代谢和IR，减轻肝脏脂肪变性程度及炎症反应，从而治疗非酒精性脂肪性肝病。