五指山市野生茶树种质资源及抗氧化活性研究

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五指山市位于海南岛的中南部,大多数地区海拔高度在600m以上,特别是五指山,海拔1867m,为海南最高山,属山地地形地貌。长年昼夜温差大,独特的地理环境适宜茶树生长,拥有丰富的野生茶树种质资源。五指山野生茶树历史上从形态学方面鉴定为普洱茶(Camellia sinensis var.assamica),但五指山地区的野生茶树所在的群落组成、结构、物种多样性的研究刚起步,仍缺乏野生茶树的种质资源的遗传鉴定及化学成分与抗氧化活性研究。本文在群落调查与形态特征调查分析的基础上,选择4个通用引物片段,其中叶绿体基因有3个分别为rbcL,matK,psbA-tmH,核基因有1个为ITS对野生茶树种质资源进行鉴定与分类,并对野生茶树加工成的茶成品进行化学成分与抗氧化活性研究,试图达到为保护、开发及利用五指山市野生茶树资源提供有效的依据。(1)通过样方调查研究表明,五指山市的野生茶树主要分布在海拔为1000m左右的高度,野生茶树所在的群落主要分布于热带低地雨林和山地雨林过渡区域中,群落结构可以分为乔木层、灌木层和草本层等,群落内野生茶幼苗幼树较多,多分布在灌木层和草本层中;11个样方记录的维管束植物有218种,隶属75科,150属,其中乔木层植物共有39科88属130种;而灌木层植物共有35科59属85种;草本层植物48科57属75种;乔木层、灌木层、草本层中均匀度指数相差不大,但群落中乔木层的丰富度指数、辛普森指数、香侬维纳指数均大于灌木和草本层的,因此野生茶树所在的群落物种多样性总体从结构上来说,乔木层>灌木层>草本层;由于受人类干扰程度不一样,相对低海拔(最低海拔为371m)的野生茶树分布的群落,物种的多样性贫瘠,随着海拔的升高,物种的多样性丰富。(2)通过野外观察和测量记录,发现五指山市的野生茶树的叶子多为卵圆、披针或倒披针形,花瓣颜色白色,雄蕊比雌蕊要长1-2mm,子房3室,每室一个胚珠,与普洱茶(C.sinensis var.assamica)和白毛茶(Csinensis var.pubilimba)等相比较,五指山市野生茶在形态特征上更接近普洱茶,但五指山市野生茶的叶子要比普洱茶大,侧脉稍多,五指山市野生茶的花瓣5枚,普洱茶的花瓣多为6-7枚,还是有一定差异。(3)本文以psbA-trnH叶绿体编码基因序列成功鉴定五指山市野生茶和普洱茶、白毛茶之间的亲缘关系,再结合叶、花、果实等外形特征,发现五指山市野生茶与普洱茶最接近,但也明显分离。基于psbA-trnH序列聚类的结果是,普洱茶与白毛茶为一类,五指山市野生茶为另一类,在五指山市野生茶这一类中,可细分两亚类,第一亚类为南圣毛祥2-12与番赛-25这两份样品,在进化树图上,它们亲缘关系更为靠近;其他26份样品归为第二亚类。这一结果可为五指山市野生茶树新分类群的建立提供了分子水平的证据。五指山市野生茶虽然与普洱茶最接近,但应为普洱茶的一个变型,命名为海南五指山水满茶(Camellia sinensis var.assamicaf shuiman),简称水满茶。(4)本文对五指山水满茶和普洱茶及其它5种茶(白毛茶、白沙绿茶、西湖龙井、兰贵人和碧螺春)的提取物的抗氧化活性及其茶多酚、总黄酮含量进行了比较分析,结果表明:7种茶的75%乙醇提取液的抗氧化效果最好,且提取液的抗氧化活性与样品浓度成正比关系,整体热稳定性比较好;在7种茶中,水满茶清除ABTS(2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐)自由基、超氧自由基和羟自由基的能力最强,且在测试浓度范围内清除能力均与样品浓度表现出量效关系,但水满茶清除DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基的能力比较弱,排在7种茶中最后;另外,还原能力是白毛茶最强,其次是白沙绿茶和水满茶;7种茶叶的总黄酮和茶多酚含量分别在3.06-5.4%和14.6-18.1%之间,其中,水满茶的茶多酚含量最低,但总黄酮含量却最高,总体表现为五指山水满茶具有较强的抗氧化活性,较高总黄酮含量,具有较高的营养价值和保健功效。
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