褐藻多糖硫酸酯对人肾间质成纤维细胞的影响

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:xzh_endless
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究褐藻多糖硫酸酯(FPS)对体外培养的人肾间质成纤维细胞(HRIF)增殖的影响,对其分泌纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)、转化生长因子β1(TGF-β1)的影响,以及对HRIF凋亡的影响,以期探讨FPS抗肾间质纤维化的作用机理,为药物的进一步开发提供分子细胞学理论依据。方法:1. HRIF的原代培养与鉴定:取人肾肾乳头组织,切碎后经胰蛋白酶消化,用含15%胎牛血清的DMEM-F12培养液在5%CO2、37℃孵育箱中培养。通过细胞形态、免疫荧光化学检测波形蛋白、α-肌动蛋白、细胞角蛋白和结蛋白等作细胞鉴定。2.台盼兰拒染法进行细胞毒试验检测药物安全性:以不同浓度的FPS(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)孵育体外培养的HRIF不同时间(24小时、48小时),用不加药物的HRIF作对照。结束培养后,洗脱细胞,台盼兰染色,计算各组活细胞比率。3. MTT法检测细胞增殖:以不同浓度的FPS(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)孵育体外培养的HRIF不同时间(24小时、48小时),用不加药物的HRIF作对照。结束培养后,采用MTT法检测各组HRIF增殖情况。4. ELISA法分别检测FN、LN、TGF-β1的水平:以不同浓度的FPS(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)孵育体外培养的HRIF不同时间(24小时、48小时),用不加药物的HRIF作对照。结束培养后各组取细胞培养上清液,用ELISA法分别检测FN、LN、TGF-β1的分泌水平。5.流式细胞仪检测HRIF凋亡情况:以不同浓度的FPS(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml)孵育体外培养的HRIF 24小时,
其他文献
农业生产实踐証明,农作物要获得高額的产量,必須要有充分的营养,也就是說要有肥沃的土壤与足够的肥料。种植綠肥牧草是培育高度肥沃土壤的重要措施之一。使土壤愈种愈肥,塊
期刊
你们在这里干什么?
期刊
期刊
目的:观察高胆固醇血症致A β增高拟老年性痴呆大鼠模型学习 记忆能力,以及脑灵汤对高胆固醇诱导Aβ增高致老年性痴呆大鼠模 型学习记忆能力、Y-电迷宫试验、脑APP含量的影响
目的:  随着社会发展,流行病学研究发现,冠心病是种具有较高致病率和致死率的心血管疾病,是公认的人类健康主要杀手之一。药物干预促使缺血心肌治疗性血管新生为治疗冠心病提
小麦在整个生长发育过程中,对外界有许多要求,但所要求的主要因子,大都要通过土壤来获得。由于各地土壤不同,性质殊异,在不同土壤上小麦生长发育的情况也不同。我国农民在长
在建筑设计中,为了表现真实的建筑效果、明朗的光线或者热闹的商业气氛,需要制作静态建筑效果图来观察是否达到预期的效果.制作静态建筑效果图的方法众多,为了制作照片级的建
目的:随着人口老年化的增长,抗衰老已成为全球重大性课题。本实验以老年小鼠为研究对象,观察还少丹对实验小鼠抗氧化功能、B-型单胺氧化酶(MAO—B)活性及DNA结构的影响。同时,以
通过研究SSL安全协议,分析了协议采用的RSA加密算法的不足,介绍了ECC椭圆曲线加密算法的基本思想,提出了基于优化的ECC椭圆曲线加密算法的SSL协议改进方法,使得改进后的SSL协