阿尔茨海默病(Alzheimers disease，AD)是一种渐进性的、变性神经紊乱疾病，从而导致记忆和行为的损伤。乙酰胆碱酯酶(AChE)是AD的一个酶抑制剂作用靶点，对于AD的治疗，一种有希望的策略是乙酰胆碱酯酶抑制剂的使用。现代研究表明了淡豆豉有很好的乙酰胆碱酯酶抑制作用，淡豆豉药材中含有丰富的异黄酮可能是其起作用的物质基础，但尚不清楚具体作用的有效成分。本研究建立淡豆豉的UPLC指纹图谱;采用紫外-可见分光光度计（UV法）测定不同产地淡豆豉中总异黄酮的含量，UPLC同时测定淡豆豉中大豆苷，黄豆黄苷，染料木苷，黄豆苷元，黄豆黄素，染料木素这6种异黄酮的含量并进行性状观察比较，建立淡豆豉的质量评价方法，保证淡豆豉的质量及临床用药的安全性和有效性;采用酸水解法使大豆异黄酮糖苷转化为苷元，并应用相关性分析法进一步明确其抑制乙酰胆碱酯酶的活性成分。主要研究内容和结果如下：　　1.性状鉴别通过在药店、市场购买等方式收集不同产地的淡豆豉药材，对其外观性状进行鉴别。　　2.指纹图谱研究采用ACQUITY UPLC(@)BEH C18色谱柱(2.1mm×50mm，1.7um)，流动相为0.1％冰乙酸-乙腈梯度洗脱，流速为0.3ml·min-1，检测波长260nm，线性梯度(0min，95％A;1min，85％A;4min，70％A;8min，70％A;10min，85％A)。对包括对照药材在内的不同产地11批淡豆豉药材进行指纹图谱研究。采用SPSS21.0软件对不同产地药材的指纹图谱进行聚类分析，根据聚类分析的结果将11批淡豆豉样品分为2类，选定第1类8批样品建立共有模式，得出淡豆豉药材的对照指纹图谱。将对照图谱和11批不同产地药材图谱导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004B版)”，对各个产地的淡豆豉药材进行相似度评价。　　3.含量测定方法采用ACQUITY UPLC(@)BEH C18色谱柱(2.1mm×50mm，1.7μm)，流动相A为0.1％冰乙酸溶液，流动相B为乙腈，线性梯度(0-1min，95％-85％A;1-4min，85％-70％A;4-8min，70％A)，流速为0.3ml·min-1，检测波长260nm，柱温25℃，进样量10ul，同时测定淡豆豉中大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、黄豆苷元、黄豆黄素、染料木素的含量。以染料木素为对照，以甲醇为空白溶液，在260nm处测定样品中总异黄酮的含量，并绘制标曲线。　　4.总异黄酮制备取适量脱脂后淡豆豉粗粉置圆底烧瓶中，料液比1∶10，80％甲醇80℃回流提取2次，每次1h，抽滤合并滤液减压浓缩，提取液经乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯层溶液减压浓缩成含生药0.5g·ml-1的溶液经AB-8大孔吸附树脂纯化，最大药材上样量与树脂用量之比为2∶1，2BV/h的速度上样，反复上样3次后用9BV的水，2BV/h的速度洗脱，弃去洗脱液，继而用10BV50％乙醇和9BV70％乙醇以2BV/h的速度洗脱，接收洗脱液，减压浓缩干燥，得总异黄酮。　　5.酸水解法水解异黄酮通过对水解温度，盐酸浓度，水解时间等单因素进行考察，优化酸水解条件。　　6.活性成分筛选采用Ellman比色法测定乙酰胆碱酯酶抑制率。UPLC测异黄酮水解前后大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、黄豆苷元、黄豆黄素、染料木素的含量。采用SPSS21.0软件进行相关性分析筛选其活性成分。　　11批样品的指纹图谱中有10个共有色谱峰，确认其中6个峰分别为大豆苷（1号峰）、黄豆黄苷（2号峰）、染料木苷（4号峰）、黄豆苷元（8号峰）、黄豆黄素（9号峰）、染料木素（10号峰）。相似度均高于0.9000，可分为2类，聚类分析结果和相似度评价结果一致。　　6种异黄酮在8min内完全分离并进行含量测定，分析物在相应范围内线性关系良好，精密度、重现性、回收率均符合要求。　　异黄酮的水解工艺为温度70℃，盐酸甲醇浓度3mol·L-1，水解5h，对乙酰胆碱酯酶的抑制率最高;相关性分析结果显示黄豆苷元、黄豆黄素、染料木素，这三种苷元类成分与抑制率的相关性较大，且总苷元＞染料木素＞黄豆苷元＞黄豆黄素，总苷元与抑制率的相关性达到了0.869(P＜0.01)。　　本文建立了淡豆豉的UPLC指纹图谱，并建立了UPLC-PDA同时测定淡豆豉中大豆苷，黄豆黄苷，染料木苷，黄豆苷元，黄豆黄素，染料木素这六种异黄酮的方法，大大提高了分析效率，为全面控制淡豆豉的质量提供参考。　　采用大孔吸附树脂法纯化淡豆豉中的异黄酮，并用酸水解法纯化所得的异黄酮，使糖苷类成分转化为活性较高的苷元。采用相关性分析法筛选淡豆豉中抑制AChE的活性成分，总苷元与抑制率的相关性最高，所以淡豆豉中起乙酰胆碱酯酶抑制作用的活性成分可能为总苷元部分。