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目的:通过观察二硫苏糖醇(Dithiothreitol,DTT)复合物对SD大鼠硒性白内障的影响,探讨该复合物在防治SD大鼠硒性白内障中的作用机制和有效性,为研究开发新型抗白内障药物提供动物实验基础。
方法:1.动物模型制作:将12天龄SD大鼠乳鼠颈背部皮下注射亚硒酸钠(Na<,2>SeO<,3>),隔日一次,共分三次,累及剂量达到230μg。2、药物影响实验:将硒性白内障模型SD大鼠随机分成对照组和给药实验组,对照组给予生理盐水滴眼,实验组分三组,分别给予二硫苏糖醇(DTT)复合物、白内停眼液、卡林优眼液滴眼,给药20天后观察鼠眼晶状体混浊度变化,按分级标准记录晶状体混浊度:另外,使用自身对照法的统计方法设计,将25只SD大鼠左眼作为对照组给予生理盐水滴眼,右眼作为给药实验组给予自制的二硫苏糖醇(DTT)复合物滴眼,5次/天,共20天,之后观察鼠眼晶状体混浊度的变化,并测量鼠眼核性混浊区域的直径。3、蛋白质测定:将给予二硫苏糖醇(DTT)复合物滴眼20天后的SD大鼠断颈处死,取出眼球并完整分离出晶状体,测定其晶状体高分子量蛋白质(HMW)和低分子量蛋白质含量(LMW),并与正常同龄SD大鼠晶状体蛋白质含量进行对比。
结果:实验动模型采用文献报道的造模方法,以最大累积剂量,60%最大累积剂量,30%最大累积剂量给12天龄SD大鼠乳鼠和成鼠注射,结果发现按照60%最大累积剂量造模的SD大鼠乳鼠符合实验观察条件。实验中观察到基于以二硫苏糖醇(DTT)为主的复合物对鼠硒性白内障的发展有显著抑制作用(P<0.01),与临床上常用的抗白内障药物(白内停、卡林优)进行对比研究发现以DTT为基本成分的复合物要优于该两种临床常用抗白内障药物(P<0.01)。通过蛋白质测定,发现以DTT为基本成分的复合物干预的鼠眼晶状体中高分子量蛋白质(HMW)含量较未进行干预的鼠眼晶状体为低,而低分子量蛋白质(LMW)为高。
结论:硒性白内障是用于研究抗白内障药物的理想实验模型。本实验首次给予SD大鼠最大累积剂量的60%即230μg,可形成为全白内障,实验鼠无死亡,为药物局部干预实验提供了理想的条件。在造模完成后的第7~20天时给予药物干预,利于观察药物对SD大鼠晶状体皮质混浊发生、发展的干预情况。含有DTT的复合物能抑制SD大鼠硒性白内障的发生、发展,二硫苏糖醇(DTT)复合物抑制后期皮质混浊的作用要优于不含DTT的抗白内障药物。二硫苏糖醇(DTT)复合物抑制SD大鼠硒性白内障皮质混浊的作用优于白内停和卡林优。二硫苏糖醇(DTT)作为蛋白质巯基保护剂,可以有效抑制βB晶体蛋白的受热聚集变性二硫苏糖醇(DTT)复合物抑制SD大鼠硒性白内障的发生机制,可能是由于抗氧化作用和抑制低分子量蛋白质聚合形成高分子量蛋白质,而影响白内障的发生、发展。