青霉素是一类重要的β-内酰胺类抗生素，也是使用最广泛的治疗乳牛乳腺炎及其它疾病的抗生素。由于大量使用而导致的青霉素残留，既威胁着人类的身体健康又制约着我国奶业经济的发展。所以制备灵敏度高，使用方便而又经济的青霉素传感器对于保护人类身体健康是非常必要的。电化学免疫传感器利用抗原和抗体间的高度特异性结合，将传统的免疫测试方法与近代生物传感技术融为一体，既具有免疫反应的高选择性又兼有电化学分析的高灵敏性，广泛应用于医疗卫生、环境等领域。本论文以新亚甲蓝为介体，利用电聚合法和共价键合法制备成电流型青霉素免疫传感器，并就传感器的检测原理、电化学行为、检测条件的优化、影响因素以及在牛奶中的实际检测等问题作了详细地研究。具体内容概括如下：1．对新亚甲蓝（NMB）单体在溶液中的电化学行为作了探讨。选择新亚甲蓝作为中间介体是由于其具有很好的氧化还原可逆性，在中性或偏碱性溶液中属于一质子两电子反应，并在较宽的pH范围内均具有较好的电化学响应，而且该pH范围恰好为保持生物分子活性及酶的催化活性的适宜酸度范围。2．利用电聚合法将纳米金和新亚甲蓝聚合于电极表面，利用纳米金对抗体的吸附作用制备成青霉素传感器，并通过红外、紫外、扫描电镜法及电化学方法对传感器进行了表征。该传感器对磷酸缓冲溶液中青霉素响应的线性范围为0.5～6 ng／mL，检出限为0.067 ng／mL。3．利用共价键合法将辣根过氧化酶（HRP）和NMB修饰于电极表面制备成过氧化氢（H₂O₂）传感器，该传感器对H₂O₂具有响应速度快、线性范围宽、灵敏度高的特点。探讨了该传感器在0.1 mol／L磷酸缓冲溶液（pH=7.0）中的电化学和动力学性质。测得电子转移系数为0.861，表观反应速率常数为1.27 s^-1。线性响应范围为2.5～100μmol／L，检出限2.07μmol／L。4．将NMB与HRP标记的青霉素抗体利用共价键合法修饰于电极表面制备成青霉素免疫传感器，并对牛奶中的青霉素进行实际检测，其检出范围为0.25～3 ng／mL，检出限为0.298 ng／mL。就抗体的纯化与标记、抗体的效价、传感器的表征、传感器的选择性、条件的优化、重现性、稳定性和影响因素等问题作了深入地探讨。