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目的:研究胸大肌肌瓣提供同种异体气管血供的可能性;观察研究气管血运、通畅性、管腔上皮细胞形态变化;探讨同种异体长段气管移植技术的可行性、安全性。
方法:
1.深低温保存气管库的建立:选3条体重10-15kg的成年犬,氯胺酮肌肉注射麻醉(10mg/kg),切除气管全长分两段,每段6cm长,用10%二甲基亚砜(DMSO)作冷冻保护剂,将装有气管的液氮保存管放置于4℃冰箱中冷平衡4小时,然后采用程控降温仪程序降温,降温速率1℃/分,降至-85℃后,置于液氮中20天以上。应用移植气管时,将冻储的标本随液氮保存管一起置于37℃恒温水浴中均匀复温,将标本反复冲洗。
2.手术方法:选6条体重10-15kg的成年犬,麻醉。A组:行胸部中内侧做约7cm长切口,游离胸大肌,用胸大肌包裹6cm长同种异体气管(该气管已低温冷冻处理过),常规分层缝合胸部。B组:同一个犬腹部正中约4cm长切口,打开腹腔,用大网膜包裹同种异体气管(该气管已低温冷冻处理过),常规分层缝合腹部。术后分别于2周、1个月及3个月3个时间点,各无痛法处死2只犬,取出包裹气管的标本进行光镜的观察。
结果:
6只实验犬术后全部成活到预期的时间,A组胸部和B组腹部各自包埋的气管均能成活到3个月以上。
A组胸部:1.包埋2周的气管红润光滑、通畅,镜下:气管黏膜完好,软骨细胞形态正常,软骨未见异常,软骨下有新生血管形成。2.包埋1个月和3个月的气管均稍有变形狭窄,气管内肉芽增生,镜下:气管黏膜部分坏死,部分软骨细胞核仁消失,部分软骨坏死钙化。
B组腹部:1.包埋2周的气管红润光滑、通畅,镜下:气管黏膜完好,小部分软骨细胞核仁消失,软骨大部分存活,小部分坏死,软骨面纤维结缔组织存活,血管增生扩张充血。2.包埋1个月和3个月的气管均稍有变形狭窄,气管内肉芽增生,镜下均气管黏膜部分坏死,部分软骨细胞核仁消失,软骨部分坏死钙化。
结论:
1.胸大肌肌瓣给移植气管提供血运是可行的,移植气管2周后再血管化。
2.胸大肌肌瓣给移植气管提供血运操作简单、创伤轻。
3.同种异体气管移植的动物实验仍有待于进一步的研究。