猕猴桃细菌性溃疡病是危害猕猴桃植株的一种毁灭性细菌病害,该病发展迅速,防治难度大,严重制约了猕猴桃产业的发展。由于该病危害严重,造成的经济损失惨重,1996年猕猴桃细菌性溃疡病菌Pseudomonas syringae pv. actinidiae被列入我国森林植物检疫对象名单,2009年国家质量监督检验检疫总局关于印发《意大利猕猴桃进境植物检疫要求》的通知(国质检动函[2009]74号)中明确把丁香假单胞菌猕猴桃致病型病菌(P. syringae pv. actinidiae)列入关注的检疫性有害生物名单中。2013年,国家林业局将其列入全国林业危险性有害生物名单。本文主要对猕猴桃细菌性溃疡病菌进行了风险分析,建立了快速有效的猕猴桃细菌性溃疡病菌分子检测方法,并针对该病菌筛选了具有抑菌作用的芽孢杆菌,通过盆栽和田间试验进行了生物防治研究。主要取得了如下研究结果：1.在收集国内外研究资料的基础上,结合我国实际情况,按照《中华人民共和国国家标准——进出境植物和植物产品有害生物风险分析指南》(GB/T21658-2008)和《中华人民共和国国家标准——进出境植物和植物产品有害生物风险分析技术要求》(GB/T20879-2007)对猕猴桃细菌性溃疡病菌进行定性和定量风险评估,并提出检疫和防治管理措施。定性分析结果表明猕猴桃细菌性溃疡病菌传入和扩散可能性为中,后果评估结果为很高,得出该菌风险等级为高风险；定量分析危险性R值为2.06,按照2.5≤R<3为特别危险,2.0≤R<2.5为高度危险,1.5≤R<2.0为中度危险,1.0≤R<1.5为低度危险的分级标准,得出该病菌属于高度危险的有害生物。适生性分析结果表明,猕猴桃溃疡病菌在我国最适宜的地区(适生值μ>0.9)主要分布在四川、云南、贵州、福建、安徽、湖南、湖北、河南、江西、山东、陕西、西藏。2.本研究从四川德阳、邛崃、都江堰和崇州4个地方的猕猴桃溃疡病病枝样本中共分离得到80个菌株,按照柯赫氏法则,通过致病性测定确定代号为DY10、QL14、 DJY08、CZ20的供试菌株是试验所需的猕猴桃细菌性溃疡病菌,后经常规的形态特征、生理生化分析以及16S rDNA序列同源性分析,最终将其鉴定为P. syringae pv. actinidiae。3.通过RAPD技术,从120个随机引物中筛选出7个能够在不同菌株间(包含相似菌株)扩增出差异的、清晰的、稳定的条带的引物,再将初步筛选的引物分别扩增各供试菌株,从而筛选出最佳随机引物P7(5’-CGCAGCCGAGAT-3’),针对扩增出的1300bp左右的RAPD特异片段进行克隆测序,在测序的基础上用Primer Premier5.0软件设计一对特异引物F7/R7(引物正向序列F7为5’-CAATCATTTCGCCAGACGC-3’;反向序列R7为5’-CTACGAGGTTAGGTTCAGAGT-3’,扩增获得约为950bp的目标片段,以此将不稳定的RAPD标记转化为更为稳定的SCAR标记,建立起陔病的快速检测技术。4.利用该特异引物对包括猕猴桃溃疡病菌在内的14个菌株基因组DNA进行PCR扩增,结果表明,只有猕猴桃溃疡病菌能扩增出1条约为950bp的特异条带。试验在优化反应条件的基础上,对设计引物的特异性和灵敏性进行了验证,建立的检测方法能特异性地检测到采自果园的染病枝干组织和接种致病菌的枝干组织中是否存在猕猴桃溃疡病菌,检测灵敏度为100fg/μl。因此,利用设计合成的特异引物F7/R7,参考优化的体系和程序,结合简单的试剂盒法提取猕猴桃溃疡病菌或植物组织DNA,可以在短时间内完成对该病原菌的分子检测。本研究建立的快速有效的猕猴桃细菌性溃疡病菌分子鉴定检测方法,填补了国内猕猴桃溃疡病菌分子检测方面的空白。与传统鉴定方法相比,该方法操作简便,成本廉价,稳定性高,检测省时省力,并且可检测到未显症状的枝干或叶片中是否含有病原物,可将其应用于植物检疫,以此控制猕猴桃溃疡病在我国的进一步蔓延。5.从猕猴桃根际土壤中获得对猕猴桃细菌性溃疡病菌具有拮抗作用的芽孢杆菌共36株,通过抑菌圈法、打孔法和牛津杯法,筛选出拮抗效果最佳的生防菌株B2。B2发酵原液的盆栽试验防治效果达到90.45%；田间试验防效达到85.10%。通过对菌株形态特征、生理生化指标以及16S rDNA序列分析,初步鉴定B2为蜡样芽孢杆菌。