本文首先用Frens法即柠檬酸三钠还原氯金酸的方法制备胶体金,系统地研究了胶体金制备过程中的最佳工艺条件。最终确定的胶体金制备工艺条件为:电热套加热;还原剂快速一次性加入;制备20 nm胶体金采用1 ml还原剂,制备40 nm胶体金采用0.7 ml还原剂;采用玻璃搅拌浆搅拌充分快速;保持氯金酸沸腾2 min后再加入还原剂;还原剂加入前需预热到80℃。随后用全波长扫描和TEM考察了胶体金的质量并研究了金标的制备和纯化,确定了胶体金和hCG抗体结合的最佳pH和最小结合蛋白量。采用荧光光谱测定蛋白,显示抗体的Fab片段没有被胶体金封闭。金标经过低温高速离心的方法纯化,紫外可见光谱扫描显示体系中的游离抗体已经全部除去。在试纸条的制备过程中,通过对样品垫玻璃纤维处理液中表面活性剂、蔗糖、稳定剂各自作用的研究和NC膜划线蛋白浓度、离子强度、金标pH等对灵敏度影响的研究,最终确定灵敏度为25 mIU/ml的条件:胶体金粒径为40 nm,金标OD520 nm为5.0,T线蛋白浓度为1.0 mg/ml,T线NaCl浓度为8.5 g/L,金标结合pH为9.0;灵敏度为1500 mIU/ml的条件为:胶体金粒径为20 nm,金标OD520 nm为2.0,T线蛋白浓度为0.5 mg/ml,T线NaCl浓度为9.5 g/L,金标结合pH为9.2。试纸条在5 min之内显色。制备好的试纸条经过高温稳定性实验,时间稳定性实验,特异性实验,批内重复性实验和批间重复性实验,结果表明,本研究制备的试纸条质量可靠,可以进行进一步的临床实验考察。