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目的本研究通过鉴定与人胃癌密切相关的miRNA，探讨胃癌可能的发病机制，并初步筛选出不同分化程度胃癌细胞株miRNA差异表达谱，为进一步研究胃癌发生、发展的机制以及发现胃癌诊断和治疗相关的分子标志物奠定基础。方法1.体外培养高分化人胃癌细胞株NCI-N87、低分化人胃癌细胞株MGC-803和正常胃黏膜上皮细胞GES-1，分别提取以上各种人胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞中总RNA，应用miRNA芯片技术筛选差异表达的miRNA，然后采用实时荧光定量PCR技术验证部分芯片结果。2.选定特定的miRNA,采用实时荧光定量PCR技术验证其在27例胃癌及其配对非肿瘤组织中的表达。结果1.miRNA芯片检测结果发现，与正常胃粘膜细胞GES-1相比，胃癌细胞株NCI-N87及MGC-803中共有147个miRNAs存在两倍及以上差异表达，其中NCI-N87中有54个miRNAs表达上调，58个miRNAs表达下调；MGC-803中有42个miRNAs表达上调，33个miRNAs表达下调。选取在这两种细胞中均上调表达的miR-16及下调表达的miR-7、miR-185进行实时荧光定量PCR验证，证明芯片结果基本可信。2.芯片结果提示部分病毒相关miRNA在胃癌细胞与正常胃粘膜细胞中差异表达，如kshv-miR-K12-12*、ebv-miR-BART19-3p、hsv1-miR-H7*等。3.对27例患者胃癌及癌旁非肿瘤组织miR-7表达量的研究发现，相比于配对癌旁非肿瘤组织，19例患者胃癌组织中miR-7表达量下调，统计学分析显示该差异具有统计学意义(t=-2.809，P<0.05)，说明miR-7在胃癌组织中的表达较配对非肿瘤组织下调。结论1.初步筛选出147个人胃癌相关miRNAs，并且不同分化程度的胃癌细胞株存在特异的miRNA表达谱，为建立一种新的以miRNA为基础的诊断和治疗胃癌的方法提供了相关信息。2.病毒相关miRNA在胃癌细胞株与正常胃粘膜细胞中差异表达，提示部分病毒miRNA也可能参与了人胃癌的发生及发展过程。3.miR-7可能在人胃癌中低表达，并作为一种抑癌基因参与胃癌的发生与发展过程。